【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人胚胎眼Tenon's囊成纖維細胞；HFTF培養
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 北京眼科研究所建系。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2~1:3傳代；3~4天1次。
傳代情況 P9
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法（-）
STR
同工酶
染色體 46,XX
使用權限 A類
復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
Hyl(Human hydroxylysine) ELISA Kit 人羥賴氨酸 Multi-class antibodies 規格： 48T
GAP(Human GTPase activating protein) ELISA Kit 人GTP酶活化蛋白 Multi-class antibodies 規格： 48T
Apo-H(Human Apolipoprotein H) ELISA Kit 人載脂蛋白H Multi-class antibodies 規格： 48T
GPI(Human glycophosphatidylinositol) ELISA Kit 人糖磷脂酰肌醇 Multi-class antibodies 規格： 48T
PWM(Human pokeweed mitogen) ELISA Kit 人美洲商陸素 Multi-class antibodies 規格： 48T
LPS(Human Lipopolysaccharides) ELISA Kit 人脂多糖/內毒素 Multi-class antibodies 規格： 48T
Human preptin ELISA Kit 人preptin Multi-class antibodies 規格： 48T
PPAR- Alpha(Human peroxisome proliferators activator receptors alpha) ELISA Kit 人過氧化物酶體增殖物激活受體α Multi-class antibodies 規格： 48T
Apo-E(Human Apolipoprotein E) ELISA Kit 人載脂蛋白E Multi-class antibodies 規格： 48T
OGP(Human Osteogenic Growth Peptide) ELISA Kit 人成骨生長肽 Multi-class antibodies 規格： 48T
ODF(Human osteoclast differentiation factor) ELISA Kit 人破骨細胞分化因子 Multi-class antibodies 規格： 48TFEZ2 英文名稱： 椎骨蛋白2抗體 ?0.2ml
Factor VII light chain 英文名稱： *VII ?0.1ml
Factor X heavy chain 英文名稱： *10抗體 ?0.2ml
AFF2 英文名稱： 脆X綜合征相關蛋白AFF2抗體 ?0.2ml
FGGY 英文名稱： 肌側索硬化癥相關蛋白FGGY抗體 ?0.2ml
FIG4 英文名稱： 肌側索硬化癥相關蛋白FIG4抗體 ?0.2ml
FLAD1 英文名稱： 黃素腺嘌呤二核苷酸抗體 ?0.2ml
FPR3 英文名稱： 甲酰肽受體3抗體（脂氧素A4受體） ?0.2ml
Filaggrin 英文名稱： 兜甲蛋白抗體 ?0.1ml
FTO 英文名稱： 脂肪堆積和肥胖相關蛋白抗體 ?0.2ml
FARP2 英文名稱： *核苷酸交換因子FARP2抗體 ?0.2ml
FK506 binding protein associated protein 英文名稱： FK506結合蛋白相關蛋白抗體（*相關蛋白） ?0.2ml
FGFR1OP 英文名稱： 成纖維細胞生長因子受體1原癌基因伴侶蛋白抗體 ?0.2ml
FAT 英文名稱： 鈣粘蛋白家族成員7抗體 ?0.1ml
