【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人胚皮膚成纖維細胞；CCC-ESF-1?使用說明書
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 取材自引產的15周胚胎組織，由中國醫學*基礎醫學研究所細胞資源中心建立。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代；3~4天1次。
傳代情況 P9
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法（-）
STR Amelogenin：X，Y；CSF1PO：12；D13S317：8；D16S539：12；D18S51：13，20；D19S433：14.2，16.2；D21S11：29，32.2；D2S1338：19，20；D3S1358：14，15；D5S818：12，13；D7S820：10；D8S1179：13，14；FGA：21，23；TH01：7，9；TPOX：9，10；vWA：16；
同工酶
染色體 46,XY
使用權限 A類
人胚皮膚成纖維細胞；CCC-ESF-1?使用說明書復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
人胚皮膚成纖維細胞；CCC-ESF-1?使用說明書操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
BMPs(Human bone morphogenetic proteins) ELISA Kit 人骨形成蛋白 Multi-class antibodies 規格： 48T
RBP-4(Human Retinol binding protein 4) ELISA Kit 人*結合蛋白4 Multi-class antibodies 規格： 48T
PLP(Human proteolipid protein) ELISA Kit 人蛋白脂質蛋白抗體 Multi-class antibodies 規格： 48T
VMA(Human vanillylmandelic acid) ELISA Kit 人垂草扁桃酸 Multi-class antibodies 規格： 48T
GKRP(Human glucokinase regulatory protein) ELISA Kit 人葡萄糖激酶調節蛋白 Multi-class antibodies 規格： 48T
HA(Human hemagglutinin) ELISA Kit 人血凝素 Multi-class antibodies 規格： 48T
ADRP(Human adipose differentiation-related protein) ELISA Kit 人脂肪分化相關蛋白 Multi-class antibodies 規格： 48T
CALD(Human Caldesmon) ELISA Kit 人鈣調結合蛋白 Multi-class antibodies 規格： 48T
CaN(Human calcineurin) ELISA Kit 人鈣調磷酸酶 Multi-class antibodies 規格： 48T
Human CTX-2 ELISA Kit 人骨退化特異標志物 Multi-class antibodies 規格： 48TFNDC8 英文名稱： Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白8抗體 ?0.2ml
FNDC3B 英文名稱： Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白3B抗體 ?0.2ml
FUS 英文名稱： 粘液樣脂肪肉瘤蛋白FUS1抗體 ?0.2ml
FOLH1B 英文名稱： 細胞生長抑制蛋白26/前列腺特異膜抗原樣蛋白抗體 ?0.2ml
FAM123B 英文名稱： 腎母細胞瘤基因X染色體蛋白抗體 ?0.2ml
phospho-FADD (Ser194) 英文名稱： 磷酸化Fas死亡結構域相關蛋白抗體 ?0.1ml
FAM123B 英文名稱： 腎母細胞瘤X蛋白抗體 ?0.2ml
人胚皮膚成纖維細胞；CCC-ESF-1?使用說明書FUCA1 英文名稱： α-L巖藻糖苷酶抗體 ?0.2ml
FbxW2 英文名稱： FbxW2蛋白抗體 ?0.2ml
Fbxw7 英文名稱： Fbxw7蛋白抗體 ?0.2ml
FBXW8 英文名稱： FBXW8蛋白抗體 ?0.2ml
human Fibrinogen 英文名稱： *單克隆抗體 ?0.1ml
