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上海撫生實業(yè)有限公司
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所 在 地上海市
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更新時間:2017-01-19 16:46:39瀏覽次數(shù):220次
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人胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38]特性現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
人胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38]特性 | 成纖維細胞樣 | 上海 | 3-5天 |
細胞名稱 人胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38]特性
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 Leonard Hayflick建系;有限傳代細胞系;壽命為50±10代(倍增時間24h);來自3個月的正常胚胎肺組織。該細胞系是*個用于人疫苗制備的*;培養(yǎng)基中添加TNFα可以加快細胞生長。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS;1%NEAA
傳代方法 1:2~1:4傳代;2~3天換液1次。
傳代情況 P19
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,12;D13S317:11;D16S539:11,12;D18S51:16,18;D19S433:13,16.2;D21S11:30,30.2;D2S1338:19,25;D3S1358:16,17;D5S818:10;D7S820:9,11;D8S1179:14;FGA:22,24;TH01:8,9.3;TPOX:8;vWA:19,20;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38]特性來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。
人胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38]特性細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
人操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
GATA2 英文名稱: GATA結(jié)合蛋白2抗體 ?0.1ml
Growth Arrest Specific Protein 7 英文名稱: 生長休止特定蛋白7抗體 ?0.2ml
phospho-GluR1 (Ser836) 英文名稱: 磷酸化*受體1抗體 ?0.1ml
GPR116 英文名稱: G蛋白偶聯(lián)受體116抗體 ?0.2ml
G protein alpha 12 英文名稱: 鳥苷酸調(diào)節(jié)蛋白12抗體 ?0.1ml
phospho-GFAP (Ser8) 英文名稱: 磷酸化膠質(zhì)纖維酸蛋白抗體 ?0.1ml
phospho-GABBR2 (Ser783) 英文名稱: 磷酸化G氨基丁酸B型受體2抗體 ?0.1ml
phospho-GABBR2 (Ser892) 英文名稱: 磷酸化G氨基丁酸B型受體2抗體 ?0.1ml
GDF10 英文名稱: 生長分化因子10抗體(TGF-β超家族10) ?0.1ml
GPCR LOC51210 英文名稱: G蛋白偶聯(lián)受體LOC51210蛋白抗體 ?0.2ml
GIG34 英文名稱: 細胞生長抑制蛋白34 ?0.1ml
Growth Hormone 英文名稱: 生長激素抗體 ?0.1ml
GMPPA 英文名稱: GDP甘露糖焦磷酸化酶抗體 ?0.2ml
GPR171 英文名稱: G蛋白偶聯(lián)受體171抗體 ?0.2mlDPYSL2(human dihydropyrimidinase-like 2) ELISA Kit 人二氫嘧啶酶樣2 Multi-class antibodies 規(guī)格: 48T
SGK2(Human serum/glucocorticoid regulated kinase 2) ELISA KIT 人血清/糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶2 Multi-class antibodies 規(guī)格: 48T
MKK6(Human mitogen activated protein kinase kinase 6) ELISA Kit 人絲裂原活化蛋白激酶激酶6 Multi-class antibodies 規(guī)格: 48T
PDXP(Human pyridoxal/pyridoxine vitamin B6-phosphatase) ELISA Kit 人吡哆醛/吡哆醇*6磷酸酶 Multi-class antibodies 規(guī)格: 48T
Tgtp(Human T-cell specific GTPase) ELISA Kit 人T細胞特異鳥苷三磷酸酶 Multi-class antibodies 規(guī)格: 48T
FDFT1(Human farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1) ELISA Kit 人法尼基二磷酸法尼基轉(zhuǎn)移酶1 Multi-class antibodies 規(guī)格: 48T
D-LDH(Human D-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 人D-乳酸脫氫酶 Multi-class antibodies 規(guī)格: 48T
Alpha1-AT(Human Alpha1-Antitrypsin) ELISA Kit 人α1抗* Multi-class antibodies 規(guī)格: 48T
KLK 1(Human Kallikrein 1) ELISA Kit 人*1 Multi-class antibodies 規(guī)格: 48T
KLK 6(Human Kallikrein 6) ELISA Kit 人*6 Multi-class antibodies 規(guī)格: 96T
人胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38]特性PaCoA(Human Phosphorylated acetyl CoA) ELISA Kit 人磷酸化乙酰* Multi-class antibodies 規(guī)格: 48T
PGAM2(Human phosphoglycerate mutase 2) ELISA Kit 人磷酸甘油酸變位酶2 Multi-class antibodies 規(guī)格: 48T
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