人肺細(xì)胞；HLF-a特性

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更新時(shí)間：2017-01-19 17:04:14瀏覽次數(shù)：267次

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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

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產(chǎn)品簡介

人肺細(xì)胞；HLF-a特性現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好，同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明，歡迎前來選購！

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品名稱	生長特性	發(fā)貨地	貨期
人肺細(xì)胞；HLF-a特性	成纖維細(xì)胞樣	上海	3－5天

細(xì)胞名稱 人肺細(xì)胞；HLF-a特性
形態(tài)特性   上皮樣細(xì)胞
生長特性貼壁生長
特征特性
培養(yǎng)條件
傳代方法
傳代情況 P86
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測培養(yǎng)法（-）
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 B類

來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
GGA3   英文名稱：   γ-銜接蛋白相關(guān)蛋白3抗體   ?0.2ml
GGN   英文名稱：   配子生成素抗體   ?0.2ml
GGT2 heavy chain   英文名稱：   γ谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶2重鏈抗體   ?0.2ml
GGT5 heavy chain   英文名稱：   γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶5重鏈抗體   ?0.2ml
phospho-GATA3 (Ser115)   英文名稱：   磷酸化GATA結(jié)合蛋白3抗體   ?0.1ml
phospho-GATA3 (Ser162)   英文名稱：   磷酸化GATA結(jié)合蛋白3抗體   ?0.1ml
GFM2   英文名稱：   延伸因子G2抗體   ?0.2ml
Glucoamylase   英文名稱：   葡糖*抗體   ?0.2ml
GFPT1   英文名稱：   *6-磷酸果糖轉(zhuǎn)移酶抗體   ?0.2ml
GSTT1   英文名稱：   *S轉(zhuǎn)移酶θ抗體   ?0.2ml
GSTT2   英文名稱：   *S轉(zhuǎn)移酶θ2抗體   ?0.2ml
GGT6   英文名稱：   γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶6抗體   ?0.2mlsPLA2(Human secreted phospholipase A2) ELISA Kit 人分泌型磷脂酶A2   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
E3/UBPL(Human E3/ubiquitin-protein ligase) ELISA Kit 人泛素連接酶   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
MCT(Human mast cell tryptase) ELISA Kit 人肥大細(xì)胞類*   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
DT(Human dopachrome tautomerase) ELISA Kit 人多巴色素異構(gòu)酶   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
E2/UBCE(Human E2/ubiquitin-conjugating enzyme) ELISA Kit 人泛素結(jié)合酶   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
PDI(Human protein disulfide isomerase) ELISA Kit 人蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
CAD(Human caspase activated deoxyribonuclease0 ELISA Kit 人胱天蛋白酶激活的脫氧核糖核酸酶   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
Gamma-ECS(Human Gamma-glutamyl systeine synthetase) ELISA Kit 人γ谷氨酰半*合成酶   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
E1/UBAE(Human E1/ubiquitin-activating enzyme) ELISA Kit 人泛素激活酶   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
PP(Human Pepsin) ELISA Kit 人*   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
HK(Human Hexokinase) ELISA Kit 人己糖激酶   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T