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人胚腎細胞;293 HEK-293復蘇

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更新時間:2017-01-19 17:06:20瀏覽次數:159次

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產品簡介

人胚腎細胞;293 [HEK-293]復蘇現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!

詳細介紹

人胚腎細胞;293 [HEK-293]復蘇來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。

產品名稱生長特性發貨地貨期
人胚腎細胞;293 [HEK-293]復蘇成纖維細胞樣上海3-5天

細胞名稱  人胚腎細胞;293 [HEK-293]復蘇
形態特性   上皮樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   早期報道中指出該細胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側端和右側端的DNA,但是現在明確了只存在其左側端的DNA。經過對Ad5的插入點的克隆測序發現,Ad5的1~4344位線性核苷酸整合入細胞染色體19q13.2。該細胞為人類腺病毒載體擴增的宿主。可表達異常的玻連蛋白的細胞表面受體,由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。生物安全級別為2級。 
培養條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  新生牛血清,10%
傳代方法   1:2-1:4
傳代情況  P35
凍存條件   基礎培養液+20%牛血清+10%DMSO
支原體檢測  培養法(-)
STR   Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:12,14;D16S539:9,13;D18S51:17,18;D21S11:28,30.2;D3S1358:15,17;D5S818:8,9;D7S820:11,12;D8S1179:12,14;FGA:23;PentaD:9,10;PentaE:7,15;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,19
同工酶  人B,NP,G9PG,MD,AST
染色體  
使用權限  A類

人胚腎細胞;293 [HEK-293]復蘇細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
人胚腎細胞;293 [HEK-293]復蘇操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
Glypican 5    英文名稱:    磷脂酰基醇蛋白聚糖-5抗體    ?0.2ml
GADD45GIP1    英文名稱:    GADD45γ相互作用蛋白1抗體    ?0.2ml
GTPBP4    英文名稱:    GTP結合蛋白4抗體(慢腎功能衰竭蛋白)    ?0.2ml
phospho-GABBR1 (Ser923)    英文名稱:    磷酸化gamma氨基丁酸B型受體1抗體    ?0.1ml
phospho-Gria2 (Ser880)    英文名稱:    磷酸化*受體2抗體    ?0.1ml
phospho-GNA12(Ser68)    英文名稱:    磷酸化鳥苷酸調節蛋白12抗體    ?0.1ml
GATA-1    英文名稱:    珠蛋白轉錄因子1抗體    ?0.1ml
GPX3    英文名稱:    *過氧化酶3    ?0.1ml
GPX4    英文名稱:    *過氧化酶4抗體    ?0.2ml
GOLPH2    英文名稱:    高爾基體膜蛋白GP73抗體    ?0.2ml
GPR172B    英文名稱:    G蛋白偶聯受體172B抗體    ?0.2ml
GCET2    英文名稱:    生發中心B淋巴細胞相關蛋白2抗體    ?0.2ml
GNAT3    英文名稱:    G蛋白轉錄因子α3抗體    ?0.2mlSOD(Human Super Oxidase Dimutase) ELISA Kit  人超氧化物歧化酶    Multi-class antibodies    規格:     48T
DPP IV (Human dipeptidyl peptldase IV ) ELISA Kit  人二肽基肽酶Ⅳ    Multi-class antibodies    規格:     48T
HD(Human Histone Deacetylase) ELISA Kit  人組織蛋白去乙酰化酶    Multi-class antibodies    規格:     48T
Human Methylase ELISA Kit  人甲基化酶    Multi-class antibodies    規格:     48T
TRACP-5b9Human tartrate-resistant acid phosphatase 5b) ELISA Kit  人抗酒石酸酸磷酸酶5b    Multi-class antibodies    規格:     48T
PI3K(Human Phosphotylinosital 3 kinase) ELISA Kit  人磷酸肌醇3激酶    Multi-class antibodies    規格:     48T
PKB(Human protein kinase B) ELISA Kit  人蛋白激酶B    Multi-class antibodies    規格:     48T
HO-2(Human heme oxygenase 2) ELISA Kit  人血紅素氧合酶2    Multi-class antibodies    規格:     48T
M2-PK (Human Pyruvate Kinase) ELISA Kit  人丙酮酸激酶M2型同工酶    Multi-class antibodies    規格:     48T
人胚腎細胞;293 [HEK-293]復蘇TPO(Human Thyroid-Peroxidase) ELISA Kit  人甲狀腺過氧化物酶    Multi-class antibodies    規格:     48T
AFU(Human alpha-L-fucosidase) ELISA Kit  人αL巖藻糖苷酶    Multi-class antibodies    規格:     48T

 

 

 


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