細胞名稱 人胚肺成纖維細胞；MRC-5培養
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 MRC-5細胞系來自14周齡男性胎兒的正常肺組織，該細胞老化前能傳代42~46個倍增時間。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 新生牛血清，10%；水解乳蛋白，10%
傳代方法 1：2-1：4
傳代情況 P33
凍存條件 基礎培養液+20%牛血清+10%DMSO
支原體檢測 培養法（-）
STR Amelogenin:X,Y；CSF1PO:11,12；D13S317:11,14；D16S539:9,11；D18S51:15,21；D21S11:31.2；D3S1358:15,17；D5S818:11,12；D7S820:10,11；D8S1179:13；FGA:21,23；PentaD:12.；PentaE:12,16；TH01:8；TPOX:8；vWA:15
同工酶 人B,NP,G6PG,MD,AST
染色體
使用權限 A類
復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
MMP-10(Human Matrix metalloproteinase 10) ELISA kit 人基質金屬蛋白酶10 Multi-class antibodies 規格： 48T
MMP-1(Human Matrix metalloproteinase 1) ELISA kit 人基質金屬蛋白酶1 Multi-class antibodies 規格： 48T
Flt3(Human FMS-like tyrosine kinase 3) ELISA Kit 人FMS樣*激酶3 Multi-class antibodies 規格： 48T
Flt-3L(Human FMS-like tyrosine kinase 3 ligand) ELISA Kit 人FMS樣*激酶3配體 Multi-class antibodies 規格： 48T
ACE(Human Angiotensin converting enzyme) ELISA Kit 人血管緊張素轉化酶 Multi-class antibodies 規格： 48T
AMBP(Human alpha-1-microglobulin/bikunin precursor) ELISA Kit 人α1微球蛋白/bikunin前體 Multi-class antibodies 規格： 48T
Human podocin ELISA Kit 人Podocin Multi-class antibodies 規格： 48T
Human Nephrin ELISA Kit 人腎蛋白 Multi-class antibodies 規格： 48T
Alpha1-MG(Human Alpha1-microglobulin) ELISA Kit 人α1微球蛋白 Multi-class antibodies 規格： 48T
ALB(Human microalbunminuria) ELISA Kit 人尿微量白蛋白 Multi-class antibodies 規格： 48T
AAA(Human Anti-adrenocortical antibody) ELISA Kit 人抗腎上腺皮質抗體 Multi-class antibodies 規格： 48T
RANA(Human rheumatoid arthritis associated nuclear artigen) ELISA Kit 人抗類風濕關節炎核抗原 Multi-class antibodies 規格： 48TGlyt1 英文名稱： *轉運蛋白1抗體 ?0.2ml
Gsh1 英文名稱： 生長激素釋放激素同源盒蛋白1抗體 ?0.1ml
GYPB 英文名稱： 血型糖蛋白δ抗體 ?0.2ml
GluR1 英文名稱： *受體1抗體 ?0.1ml
OR10A5 英文名稱： 味覺受體蛋白家族10亞基5抗體 ?0.2ml
phospho-GluR1 (Ser863) 英文名稱： 磷酸化*受體1抗體 ?0.1ml
phospho-GluR1 (Ser645) 英文名稱： 磷酸化*受體1抗體 ?0.1ml
phospho-GluR1(Ser831) 英文名稱： 磷酸化*受體1抗體 ?0.1ml
GPR48 英文名稱： G蛋白偶聯受體48抗體 ?0.1ml
GABRA2 英文名稱： G氨基丁酸A型受體α2/GABAA Rα2抗體 ?0.2ml
GABRA4 英文名稱： G氨基丁酸A型受體α4/GABAA Rα4抗體 ?0.2ml
