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人羊膜細(xì)胞;WISH復(fù)蘇

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更新時(shí)間:2017-01-19 17:16:57瀏覽次數(shù):231次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

人羊膜細(xì)胞;WISH復(fù)蘇現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!

詳細(xì)介紹

人羊膜細(xì)胞;WISH復(fù)蘇來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。

細(xì)胞名稱  人羊膜細(xì)胞;WISH復(fù)蘇
形態(tài)特性   上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性  貼壁生長(zhǎng)
特征特性   zui初以為這株細(xì)胞的起源是正常羊膜,但隨后通過同工酶分析、HeLA標(biāo)記染色體和DNA指紋法分析,它的起源是HeLa細(xì)胞污染的。 角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。 注意: 這株細(xì)胞包含HeLa標(biāo)記染色體,是從HeLa污染細(xì)胞中建株的。 
培養(yǎng)條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法   消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況  PN
凍存條件   *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè)  陰性
STR  
同工酶  
染色體  
使用權(quán)限  B類

產(chǎn)品名稱生長(zhǎng)特性發(fā)貨地貨期
成纖維細(xì)胞樣上海3-5天

細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
FAP    英文名稱:    膠質(zhì)纖維酸蛋白抗體    ?0.1ml
GFP    英文名稱:    綠色熒光蛋白(免疫組化用抗體)    ?0.2ml
GHR    英文名稱:    生長(zhǎng)激素受體抗體    ?0.1ml
Ghrelin    英文名稱:    腦腸肽抗體    ?0.1ml
GPA33    英文名稱:    糖蛋白A33抗體    ?0.2ml
Ghrelin 28    英文名稱:    腦腸肽抗體    ?0.1ml
GLP-2    英文名稱:    胰高血糖素樣肽-2抗體    ?0.1ml
GPR114    英文名稱:    G蛋白偶聯(lián)受體GPR114蛋白抗體    ?0.2ml
GDN    英文名稱:    膠質(zhì)源連接蛋白抗體    ?0.2ml
Glycoprotein VI    英文名稱:    糖蛋白VI/六糖蛋白抗體    ?0.2ml
GMPR1    英文名稱:    鳥苷酸還原酶1抗體    ?0.2ml

 b-FABP(Human brain fatty acid binding protein) ELISA Kit  人腦型脂肪酸結(jié)合蛋白    Multi-class antibodies    規(guī)格:     96T
BK(Human Bradykinin) ELISA Kit  人血管舒緩激肽    Multi-class antibodies    規(guī)格:     48T
MLC(Human Myosin light Chain) ELISA Kit  人肌球蛋白輕鏈    Multi-class antibodies    規(guī)格:     48T
ACTN-3(Human Alpha-Actinin 3) ELISA Kit  人α-輔肌動(dòng)蛋白3    Multi-class antibodies    規(guī)格:     48T
hs-CRP(Human high sensitivity C-Reactive Protein) ELISA Kit  人超敏C反應(yīng)蛋白    Multi-class antibodies    規(guī)格:     48T
Tn- I (Human Troponin I ) ELISA Kit  人肌鈣蛋白Ⅰ    Multi-class antibodies    規(guī)格:     48T
SAA(Human Serum amyloid A) ELISA Kit  人血清淀粉樣蛋白A    Multi-class antibodies    規(guī)格:     48T
Hsp-60(Human Heat Shock Protein 60) ELISA Kit  人熱休克蛋白60    Multi-class antibodies    規(guī)格:     48T
HSP gp96(Human Heat Shock Protein glycoprotein 96) ELISA Kit  人熱休克蛋白糖蛋白96    Multi-class antibodies    規(guī)格:     48T
CT-1(Human cardiotrophln 1) ELISA Kit  人心肌營(yíng)養(yǎng)素1    Multi-class antibodies    規(guī)格:     48T
CP/CER(Human Ceruloplasmin) ELISA Kit  人銅藍(lán)蛋白    Multi-class antibodies    規(guī)格:     48T
HSP-90(Human Heat Shock Protein 90) ELISA Kit  人熱休克蛋白90    Multi-class antibodies    規(guī)格:     48T
HSP-70(Human Heat Shock Protein 70) ELISA Kit  人熱休克蛋白70    Multi-class antibodies    規(guī)格:     48T

 

 


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