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人張氏肝細(xì)胞；Chang liver特性

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更新時間：2017-01-19 17:19:50瀏覽次數(shù)：270次

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產(chǎn)品簡介

人張氏肝細(xì)胞；Chang liver特性，質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好，同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明，歡迎前來選購！

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品名稱	生長特性	發(fā)貨地	貨期
人張氏肝細(xì)胞；Chang liver特性	成纖維細(xì)胞樣	上海	3－5天

細(xì)胞名稱 人張氏肝細(xì)胞；Chang liver特性
形態(tài)特性   上皮細(xì)胞樣
生長特性貼壁生長
特征特性   張氏肝細(xì)胞1954年從非惡性的人體組織中建立。廣泛應(yīng)用于病毒學(xué)、生化和惡性腫瘤相關(guān)的轉(zhuǎn)移研究。
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  胎牛血清，10%
傳代方法   消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件   *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類

來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
GPhospho-Glucocorticoid Receptor (Ser211)   英文名稱：   磷酸化糖皮質(zhì)激素受體抗體   ?0.1ml
GPR158    英文名稱：   G蛋白偶聯(lián)受體GPR158蛋白抗體   ?0.2ml
Gamma catenin   英文名稱：   γ連環(huán)蛋白/Catenin γ /γ鏈接素抗體   ?0.2ml
GABARAPL2   英文名稱：   G1氨基丁酸A型受體相似蛋白2抗體   ?0.2ml
Gab1   英文名稱：   接頭蛋白Gab 1抗體   ?0.1ml
Phospho-GSK3 alpha (Ser21)   英文名稱：   磷酸化糖原合酶激酶3α抗體   ?0.1ml
phospho-GAP43 (Ser41)   英文名稱：   磷酸化神經(jīng)生長相關(guān)蛋白43抗體   ?0.1ml
GSK-3 Beta (CT)   英文名稱：   糖原合酶激酶-3β抗體   ?0.1ml
GRGDS   英文名稱：   抗粘附多肽抗體   ?0.2ml
GLIPR1   英文名稱：   腦膠質(zhì)瘤發(fā)病機(jī)制相關(guān)蛋白1抗體   ?0.2ml
GPM6A   英文名稱：   神經(jīng)細(xì)胞膜糖蛋白M6a   ?0.2ml
GPR101   英文名稱：   G蛋白偶聯(lián)受體101抗體   ?0.2mlHANG(Human Angiogenin) ELISA Kit 人血管生長素   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
ANG- II (Human angiotension II ) ELISA Kit 人血管緊張素Ⅱ   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
Park2(Human Parkinson disease 2 parkin) ELISA Kit 人帕金森氏病2Parkin   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
VCL(Human vinculin) ELISA Kit 人紐蛋白   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
Ntn4(Human Netrin-4) ELISA Kit 人軸突生長誘向因子4   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
Ntn1(Human Netrin-1) ELISA Kit 人軸突生長誘向因子1   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
REG-4(Human regenerating gene IV ) ELISA Kit 人再生基因蛋白IV   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
VS(Human versican/PG-M/PG-350) ELISA kit 人多功能蛋白聚糖   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
Nfkbie(Human nuclear factor of kappa light polypeptide gene enhancer in B-cells inhibitor epsilon) KLISA Kit 人B細(xì)胞κ 輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T