人前列腺正常細胞；RWPE-2復(fù)蘇來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。
細胞名稱 人前列腺正常細胞；RWPE-2復(fù)蘇
形態(tài)特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞1996年由Webber MM建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C7
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
| 產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
| 成纖維細胞樣 | 上海 | 3－5天 |
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
human hemochromatosis type 2/uvenile-uman homolog,HFE2 ELISA Kit 年2型血色素沉著癥/幼年型血色病相關(guān)蛋白2 Multi-class antibodies 規(guī)格： 48T
human frizzled homolog 8,FZD8 ELISA Kit 人卷曲蛋白8 Multi-class antibodies 規(guī)格： 48T
human snail homolog 2,SNAI2 ELISA Kit 人蝸牛同源物2 Multi-class antibodies 規(guī)格： 48T
Human golgi protein 73,GP-73 ELISA Kit 人高爾基蛋白73 Multi-class antibodies 規(guī)格： 48T
Human TU3A Protein ELISA Kit 人TU3A蛋白 Multi-class antibodies 規(guī)格： 48T
Human electron-transfer-flavoprotein beta polypeptide,ETFB ELISA Kit 人電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽 Multi-class antibodies 規(guī)格： 48T
Human dermato-pontin,DPT ELISA Kit 人皮膚蛋白 Multi-class antibodies 規(guī)格： 48T
Human soluble protein 185,sp185/HER-2 ELISA Kit 人可溶蛋白185 Multi-class antibodies 規(guī)格： 48T
Human decay-accelerating factor,DAF ELISA Kit 人降解加速因子 Multi-class antibodies 規(guī)格： 48T
Human Linker for activation of T cell,LAT ELISA Kit 人T細胞活化連接蛋白 Multi-class antibodies 規(guī)格： 48T
Human SH2-containing protein,SHC/SLP-76 ELISA Kit 人SH2攜帶蛋白 Multi-class antibodies 規(guī)格： 48TGlutamine PRPP amidotransferase 英文名稱： *磷酸核糖基焦磷酸酰胺基轉(zhuǎn)移酶 ?0.2ml
Galactosidase alpha 英文名稱： α-半乳糖苷酶抗體 ?0.2ml
GPR55 英文名稱： 蛋白偶聯(lián)受體55抗體 ?0.1ml
GADD45 gamma 英文名稱： 生長抑制DNA損傷基因45γ抗體 GADD45γ ?0.2ml
GAS2L3 英文名稱： 生長停滯特異蛋白2家族3抗體 ?0.2ml
Granzyme K 英文名稱： 顆粒酶K抗體 ?0.2ml
GDPD5 英文名稱： 甘油磷酸二酯酶磷酸結(jié)構(gòu)域5抗體 ?0.2ml
GGT1 英文名稱： γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶抗體 ?0.1ml
GABA A Receptor alpha 1 英文名稱： G1氨基丁酸A型受體α1抗體 ?0.1ml
GAD65 英文名稱： *脫羧酶-65抗體 ?0.1ml
GAD65 英文名稱： *脫羧酶-65抗體(C端） ?0.1ml
Galectin 3 英文名稱： 半乳糖凝集素3抗體 ?0.1ml
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