細胞名稱 人胚腎細胞；293 Cells, low passage使用說明書
形態特性 上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 293細胞是人胚胎腎細胞用剪切過的腺病毒5 DNA轉化得到。它們包含并表達腺病毒5的早期區段1。 它們包含并表達腺病毒5的早期區段1。 它們能互補E1失活的腺病毒突變株和載體，使其生長。 在DNA轉染檢測中它們是特別有效的受體細胞。 對于大多數即使不是全部人腺病毒的生長和溶菌斑測試，它們也表現很好。 這些細胞廣泛應用于因缺失或代換E1序列引起的E1失活突變株和腺病毒載體的繁殖與滴定。 因此它們被用來構建腺病毒載體。 用于構建腺病毒載體使用低代數細胞，一般不超過40代。 對于保持這株細胞的優良特性，正確
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優質胎牛血清，10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 P(27+5)
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
IL-1 ELISA Kit 大鼠白介素1 Multi-class antibodies 規格： 48T
IL-1 Beta ELISA Kit 大鼠白介素1β Multi-class antibodies 規格： 48T
MYO/MB ELISA Kit 大鼠肌紅蛋白 Multi-class antibodies 規格： 48T
TXB2 ELISA Kit 大鼠血栓素B2 Multi-class antibodies 規格： 48T
Ach ELISA Kit 大鼠乙酰* Multi-class antibodies 規格： 48T
TRH ELISA Kit 大鼠促甲狀腺素釋放激素 Multi-class antibodies 規格： 48T
ATGA/TGAB ELISA Kit 大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體 Multi-class antibodies 規格： 48T
CRH ELISA Kit 大鼠促腎上皮質激素釋放激素 Multi-class antibodies 規格： 48T
GnRH ELISA Kit 大鼠促腺激素釋放激素 Multi-class antibodies 規格： 48T
LTB4 ELISA Kit 大鼠白三烯B4 Multi-class antibodies 規格： 48THDAC1 英文名稱： 組蛋白去乙酰化酶1抗體 ?0.2ml
C1GALT1C1 英文名稱： 半乳糖基轉移酶2抗體 ?0.1ml
phospho-HP1 alpha (Tyr24) 英文名稱： 磷酸化異染色質蛋白1抗體（果蠅） ?1ml
Phospho-HP1(Tyr43) 英文名稱： 異染色質蛋白1磷酸化抗體（果蠅） ?1ml
HIF 2 alpha 英文名稱： 缺氧誘導因子2α /HIF-2α抗體 ?0.1ml
H1N1 matrix protein 2 英文名稱： 甲型流感病毒M2抗體 ?0.2ml
HSP47 英文名稱： 熱休克蛋白-47抗體 ?0.1ml
HPV16 E6 protein 英文名稱： 人類狀瘤病毒16抗體 ?0.1ml
HIF-1 Alpha 英文名稱： 缺氧誘導因子1α 抗體HIF-1α ?0.1ml
Histone H3 英文名稱： 組蛋白H3抗體 ?0.1ml
HHV8 ORF K2 英文名稱： 人類皰疹病毒8抗體/皰疹病毒8型 ?0.1ml
HHV4/CMV 英文名稱： 人類巨細胞病毒抗體 ?0.2ml
HHV8 ORF50 英文名稱： 人類皰疹病毒8抗體 ?0.2ml
H2N2 Hemagglutinin 英文名稱： 甲型流感病毒血凝素抗體（H2N2） ?0.2ml
