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上海撫生實業有限公司
SV40轉染人成骨細胞;hFOB 1.19特性,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!
SV40轉染人成骨細胞;hFOB 1.19特性來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
細胞名稱 SV40轉染人成骨細胞;hFOB 1.19特性
形態特性 多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 在0.6mg/ml*G418存在下,用溫度敏感的表達載體pUCSVisA58轉染自然胎兒四肢組織,建立了此細胞系。 在許可溫度33.5oC下細胞分裂很快,而在限制溫度39.5oC下細胞極少分裂或不分裂。 這些細胞具有分化為表達造骨細胞表型的成熟造骨細胞的能力。 這些細胞提供了一個同質化的快速增殖模型系統,用于研究正常人造骨細胞的分化,造骨細胞生理和激素,生長因子,和對造骨細胞的功能及分化有影響的細胞因子。
培養條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS + 300ng/ml G418
傳代方法 1:2傳代,3天傳代一次
傳代情況
凍存條件 基礎培養基+8%DMSO+39%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,13;D12S391:20,23;D13S317:11,12;D16S539:9,13;D18S51:10,17;D19S433:13,15;D21S11:29,32.2;D2S1338:23,24;D3S1358:17,18;D5S818:11,12;D6S1043:13,16;D7S820:8,10;D8S1179:10,14;FGA:19,22;Penta E:8,11;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,18;
同工酶
染色體
使用權限 A類
產品名稱 | 生長特性 | 發貨地 | 貨期 |
貼壁生長 | 上海 | 3-5天 |
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
IL-2sR Alpha/CD25 ELISA Kit 大鼠白介素2可溶受體α鏈 Multi-class antibodies 規格: 48T
IL-2sR Beta ELISA Kit 大鼠白介素2可溶受體β鏈 Multi-class antibodies 規格: 48T
IL-3 ELISA Kit 大鼠白介素3 Multi-class antibodies 規格: 48T
IL-5 ELISA Kit 大鼠白介素5 Multi-class antibodies 規格: 48T
LR/Ob-R ELISA Kit 大鼠苗條素受體 Multi-class antibodies 規格: 48T
LEP ELISA kit 大鼠瘦素 Multi-class antibodies 規格: 48T
LIF ELISA Kit 大鼠白血病抑制因子 Multi-class antibodies 規格: 48T
L-Selectin/CD62L ELISA Kit 大鼠L選擇素 Multi-class antibodies 規格: 48T
MCP-1/CCL2/MCAF ELISA KIT 大鼠單核細胞趨化蛋白1 Multi-class antibodies 規格: 48T
MCP-2/CCL8 ELISA Kit 大鼠單核細胞趨化蛋白2 Multi-class antibodies 規格: 48Tistone H3 (Di Methyl K4) 英文名稱: 二甲基化組蛋白H3K4抗體 ?0.1ml
Histone H3 (Di Methyl K9) 英文名稱: 二甲基化組蛋白H3K9抗體 ?0.1ml
Histone H3 (Tri Methyl K27) 英文名稱: *基化組蛋白H3抗體 ?0.1ml
Acetyl-Histone H3(K23) 英文名稱: 乙?;M蛋白H3抗體 ?0.2ml
Acetyl-Histone H3(K18) 英文名稱: 乙?;M蛋白H3抗體 ?0.2ml
phospho-HNF4 (Ser304) 英文名稱: 磷酸化肝細胞核因子4α抗體 ?0.1ml
HMG14 英文名稱: 高遷移率核小體結合蛋白1 ?0.1ml
Phospho-Histone H3 (Ser28) 英文名稱: 磷酸化組蛋白H3抗體 ?0.1ml
HLA DM 英文名稱: 組織相容復合體α抗體 ?0.2ml
HGFA Inhibitor 2 英文名稱: 肝細胞生長因子激活抑制蛋白2抗體 ?0.1ml
HOMER2 英文名稱: HOMER2抗體 ?0.2ml
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