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EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞（彝族）；KM934復蘇

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更新時間：2017-01-20 11:56:14瀏覽次數(shù)：201次

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產(chǎn)品簡介

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞（彝族）；KM934復蘇現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、*、實驗效果好，同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明，歡迎前來選購！

詳細介紹

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞（彝族）；KM934復蘇來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。

細胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞（彝族）；KM934復蘇
形態(tài)特性   淋巴母細胞樣
生長特性懸浮生長
特征特性   該細胞系來自一成年彝族男性的外周血，*昆明細胞庫于1993年通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)   15%NBS
傳代方法   1:2傳代；5-6天一次
傳代情況 P10
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測熒光法（-）
STR   -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類

產(chǎn)品名稱	生長特性	發(fā)貨地	貨期
	懸浮生長	上海	3－5天

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
EPO ELISA Kit 大鼠紅細胞生成素   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
EPOR ELISA Kit 大鼠紅細胞生成素受體   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
Eotaxin 1/CCL11 ELISA Kit 大鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
ECF ELISA Kit 大鼠嗜酸粒細胞趨化因子   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
EG-VEGF ELISA Kit 大鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
1,3- BetaD-Glu ELISA Kit 大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
CD30 ELISA Kit 大鼠CD30分子   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
E-Cad ELISA Kit 大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
BTC ELISA Kit 大鼠β細胞素   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
ANG-2 ELISA Kit 大鼠血管生成素2   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48Tphospho-IRS1(Tyr895)   英文名稱：   磷酸化胰島素受體底物-1抗體   ?0.1ml
phospho-IRS1(Ser1101)   英文名稱：   磷酸化胰島素受體底物-1抗體   ?0.1ml
IL-28B/IL-28C   英文名稱：   白細胞介素28B抗體   ?0.2ml
IER2   英文名稱：   即刻早期應(yīng)答基因2蛋白抗體   ?0.2ml
IP3   英文名稱：   三磷酸肌醇抗體   ?0.2ml
IL18BP   英文名稱：   白細胞介素18結(jié)合蛋白抗體   ?0.1ml
IDH2   英文名稱：   草酰琥珀酸脫羧酶抗體   ?0.1ml
IGLON5   英文名稱：   IgLON家族蛋白5抗體   ?0.2ml
IKAROS   英文名稱：   鋅指蛋白IKAROS抗體   ?0.2ml
Igj   英文名稱：   免疫球蛋白j鏈抗體   ?0.2ml
IP3 receptor   英文名稱：   5-三磷酸肌醇受體1抗體   ?0.1ml
ITPR2   英文名稱：   5-三磷酸肌醇受體2抗體   ?0.2ml
ID3   英文名稱：   DNA結(jié)合抑制因子3抗體   ?0.2ml