【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 EB病毒轉化的人B淋巴細胞；KMY0904培養
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞系來源于一無精癥男性患者的外周血。2009年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉化的方法建立。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代；5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
IL-1R1 英文名稱： 白介素1受體1抗體 ?0.1ml
IL-1R2 英文名稱： 白介素1受體2抗體 ?0.1ml
IL-20R alpha 英文名稱： 白介素20受體α鏈抗體 ?0.2ml
IL-20RB 英文名稱： 白介素20受體β鏈抗體 ?0.2ml
IAA 英文名稱： 吲哚乙酸抗體/植物生長素抗體 ?0.2ml
Integrin alpha 6 英文名稱： 整合素α6抗體 ?0.2ml
IKI3 family protein 英文名稱： 擬南芥IKI3抗體 ?0.2ml
IL-5 英文名稱： 白細胞介素5抗體 ?0.1ml
IRAK1 英文名稱： 白介素-1受體相關激酶1抗體 ?0.1ml
Integrin alpha 5/CD49e/ITGA5 英文名稱： 整合素α5抗體Integrin α5 ?0.1ml
Integrin beta 1 英文名稱： 整合素β1/Integrin β1抗體 ?0.1ml
Integrin Alpha V + Beta 3 (CD51+CD61) 英文名稱： 整合素αVβ3抗體 ?0.2mlMBP(Mouse myelin basic protein) ELISA Kit 小鼠髓磷脂堿蛋白 Multi-class antibodies 規格： 48T
TGF- Alpha(Mouse transforming growth factor Alpha) ELISA Kit 小鼠轉化生長因子α Multi-class antibodies 規格： 48T
AFP(Mouse Alpha-fetoprotein) ELISA Kit 小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白 Multi-class antibodies 規格： 48T
PAP(Mouse Prostatic Acid Phosphatase) ELISA Kit 小鼠前列腺酸磷酸酶 Multi-class antibodies 規格： 48T
PSA(Mouse prostate specific antigen) ELISA Kit 小鼠前列腺特異抗原 Multi-class antibodies 規格： 48T
(Mouse ovarian cancer marker-CA125) ELISA Kit 小鼠卵巢癌標志物CA125 Multi-class antibodies 規格： 48T
(Mouse mammary carcinoma Marker-CA153) ELISA Kit 小鼠癌標志物-CA153 Multi-class antibodies 規格： 48T
(Mouse Gastrointestinalcancer Marker-CA199) ELISA Kit 小鼠胃腸癌標志物CA199 Multi-class antibodies 規格： 48T
HO-1(Mouse heme oxygenase 1) ELISA Kit 小鼠血紅素氧合酶1 Multi-class antibodies 規格： 48T
PL-A2(Mouse Phospholipidase A2) ELISA Kit 小鼠磷脂酶A2 Multi-class antibodies 規格： 48T
TFPI(Mouse Tissue factor pathway inhibitor) ELISA Kit 小鼠組織因子途徑抑制物 Multi-class antibodies 規格： 48T
AQP-5(Mouse Aquaporin 5) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白5 Multi-class antibodies 規格： 48T
