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上海撫生實業有限公司
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY1022特性,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!
產品名稱 | 生長特性 | 發貨地 | 貨期 |
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY1022特性 | 懸浮生長 | 上海 | 3-5天 |
細胞名稱 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY1022特性
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞系來源于一成年男性的外周血。2010年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉化的方法建立。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
OLAb(Mouse oxidized lowdensity lipoprotein antibody) ELISA KIT 小鼠氧化低密度脂蛋白抗體 Multi-class antibodies 規格: 48T
ASMA(Mouse Anti-Smooth Muscle Antibody) ELISA Kit 小鼠抗平滑肌抗體 Multi-class antibodies 規格: 48T
M30(Mouse Embryonic Stem MESPU30) ELISA Kit 小鼠胚胎干細胞系MESPU30 Multi-class antibodies 規格: 48T
NF-κB p65(Mouse nuclear factor-κB p65) ELISA Kit 小鼠核因子κB亞基p65親和肽 Multi-class antibodies 規格: 48T
GP- II b III a/CD41+CD61(Mouse plaet membrane glycoprotein II b III a) ELISA Kit 小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa Multi-class antibodies 規格: 48T
FFA(Mouse free fatty acids) ELISA Kit 小鼠游離脂肪酸 Multi-class antibodies 規格: 48T
TSP-1(Mouse thrombospondin 1) ELISA Kit 小鼠血小板反應蛋白/*敏感蛋白1 Multi-class antibodies 規格: 48T
ON(Mouse osteonectin) ELISA Kit 小鼠骨粘連蛋白 Multi-class antibodies 規格: 48T
FA(Mouse Folic acid) ELISA Kit 小鼠* Multi-class antibodies 規格: 48T
histon-H2b(Mouse histon-H2b) ELISA Kit 小鼠組蛋白H2b Multi-class antibodies 規格: 48Tphospho-IkB beta (Ser19) 英文名稱: NF-kappa-B抑制子beta抗體 ?0.1ml
phospho-IKB epsilon (Ser22) 英文名稱: NF-kappa-B抑制子epsilon抗體 ?0.1ml
phospho-ICK(Tyr159) 英文名稱: */*蛋白激酶ICK抗體 ?0.1ml
IFT172 英文名稱: 細胞纖毛內轉運同源蛋白172抗體 ?0.1ml
ICK 英文名稱: */*蛋白激酶ICK抗體 ?0.2ml
ICT1 英文名稱: 肽酰tRNA水解酶ICT1抗體 ?0.2ml
IFI27 英文名稱: alpha干擾素誘導蛋白27抗體 ?0.2ml
IFT81 英文名稱: 細胞纖毛內轉運同源蛋白81抗體 ?0.2ml
IFI16 英文名稱: Gamma干擾素誘導蛋白16抗體 ?0.2ml
IDH3B 英文名稱: 異檸檬酸脫氫酶3 beta亞基抗體 ?0.2ml
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