【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人卵巢腺癌細胞；SK-OV-3培養
形態特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 SK-OV-3由Trempe G和Old LJ在1973年從一位64歲白人女性卵巢腺癌患者的腹腔積液分離得到。該細胞對腫瘤壞死因子和幾種細胞毒性藥物（包括白喉毒素、*和*）耐受。在裸鼠中成瘤，且形成與卵巢原位癌*的中度分化的腺癌。
培養條件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 10%FBS
傳代方法 1:2~1:6傳代；每周2~3次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法（-）
STR Amelogenin：X，Y；CSF1PO：11；D13S317：8，11；D16S539：12；D18S51：16，17，18；D19S433：14，14.2；D21S11：30，31.2；D2S1338：18，23；D3S1358：14；D5S818：11；D7S820：13，14；D8S1179：14，15；FGA：24，25；TH01：9，9.3；TPOX：8，11；vWA：17，18；
同工酶
染色體
使用權限 A類
復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
phospho-Kv2.1(Ser805) 英文名稱： 磷酸化鉀通道蛋白DRK1抗體 ?0.1ml
Kv2.2 英文名稱： 電壓門控鉀通道Kv2.2抗體 ?0.2ml
KIF3A 英文名稱： 驅動蛋白家族蛋白3抗體 ?0.2ml
KLC1 英文名稱： 驅動蛋白2抗體 ?0.2ml
KIAA1522 英文名稱： KIAA1522蛋白抗體 ?0.2ml
KCTD5 英文名稱： 鉀離子通道四聚體結構域蛋白5抗體 ?0.2ml
KLMW Kininogen 英文名稱： 高分子量激肽原重鏈抗體 ?0.2ml
KCTD11 英文名稱： 鉀通道四聚體結構域蛋白11抗體 ?0.2ml
KLHL26 英文名稱： Kelch樣蛋白26抗體 ?0.2ml
KDEL (ER Marker) 英文名稱： 賴氨酸，天冬氨酸，*，*相關序列抗體 ?0.1ml
KLHL10 英文名稱： Kelch樣蛋白10抗體 ?0.2mlaGT(Mouse angiotensinogen)ELISA Kit 小鼠血管緊張素原 Multi-class antibodies 規格： 48T
Hsp-60(Mouse heat shock protein 60)ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白60 Multi-class antibodies 規格： 48T
CG(Mouse Chorionic Gonadotrophin)ELISA Kit 小鼠絨毛膜促腺激素 Multi-class antibodies 規格： 48T
MDA(Mouse malondialchehyche)ELISA Kit 小鼠丙二醛 Multi-class antibodies 規格： 48T
SOD(Mouse Super Oxidase Dimutase)ELISA Kit 小鼠超氧化物歧化酶 Multi-class antibodies 規格： 48T
C-Peptide(Mouse C-Peptide)ELISA Kit 小鼠C肽 Multi-class antibodies 規格： 48T
HSP gp96(Mouse Heat Shock Protein glycoprotein 96)ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白糖蛋白96 Multi-class antibodies 規格： 48T
CH50(Mouse 50% complement hemolysis)ELISA Kit 小鼠血清總補體 Multi-class antibodies 規格： 48T
B7-2/sCD86(Mouse soluble Cluster of differentiation 86)ELISA Kit 小鼠可溶CD86 Multi-class antibodies 規格： 48T
INS(Mouse Insulin)ELISA Kit 小鼠胰島素 Multi-class antibodies 規格： 48T
HIF-1 Alpha(Mouse hypoxia-inducible factor 1 Alpha)ELISA Kit 小鼠低氧誘導因子1α Multi-class antibodies 規格： 48T
NN-T4(Mouse Neonatal Thyroxine)ELISA Kit 小鼠新生甲狀腺素 Multi-class antibodies 規格： 48T
Amylin(Mouse Amylin) ELISA Kit 小鼠胰淀素 Multi-class antibodies 規格： 48T
