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人成骨肉瘤細胞；Saos-2使用說明書

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更新時間：2017-01-20 13:08:22瀏覽次數：485次

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產品簡介

人成骨肉瘤細胞；Saos-2使用說明書細胞一般2-3天更換一次培養基，這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一，周三，周五更換培養基。

詳細介紹

產品名稱	人成骨肉瘤細胞；Saos-2使用說明書
貨期	3－5天
發貨地	上海

細胞名稱 人成骨肉瘤細胞；Saos-2使用說明書
形態特性   上皮樣；多角形
生長特性貼壁生長
特征特性   該細胞是Fogh J和Trempe G分離和鑒定的眾多人類腫瘤細胞系中的一種；該細胞來自一位11歲的白人女性的骨肉瘤組織。患者經過放療以及氨甲喋呤、*、長春新堿、*和 aramycin-C等多種藥物治療。該細胞在免疫抑制小鼠中不致瘤，細胞表達表皮生長因子EGF受體、轉化生長因子β（1型和2型）受體。
培養條件   McCoy's 5A Media (Modified with Tricine)  15%FBS
傳代方法   1:2~1:4傳代；每周1~2次。
傳代情況 C5
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測培養法（-）
STR   Amelogenin：X；CSF1PO：10；D13S317：12，13；D16S539：12，13；D18S51：15；D19S433：13；D21S11：28，30；D2S1338：18；D3S1358：14，18；D5S818：12；D7S820：8，10；D8S1179：10，12；FGA：22，25；TH01：6，9；TPOX：8；vWA：18；
同工酶
染色體   46~88
使用權限 A類

復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
ERG/KCNH2   英文名稱：   特異鉀離子通道蛋白抗體   ?0.1ml
KIF4A   英文名稱：   沉默驅動蛋白KIF4A抗體   ?0.2ml
kir 6.1   英文名稱：   ATP敏感鉀離子通道蛋白抗體   ?0.2ml
KIAA1462   英文名稱：   KIAA1462蛋白抗體   ?0.1ml
KIAA1549   英文名稱：   KIAA1549蛋白抗體   ?0.1ml
KRV-VP1+KRV-VP2 (C-terminus)   英文名稱：   基爾曼氏細小病毒VP1/VP2抗體(大鼠潛在病毒KRV)C端   ?1ml
KLHL20   英文名稱：   Kelch樣蛋白20抗體   ?0.2ml
KLST   英文名稱：   *抑制劑抗體   ?0.1ml
KLHL7   英文名稱：   kelch樣蛋白7抗體   ?0.2ml
KCNK 9   英文名稱：   TWIK相關酸敏感鉀離子通道蛋白9抗體   ?0.2mlFT3(Mouse Tri-iodothyronine)ELISA Kit 小鼠三碘甲狀腺原氨酸   Multi-class antibodies   規格：   48T
C5a(Mouse Complement fragment 5a)ELISA Kit 小鼠補體片斷5a   Multi-class antibodies   規格：   48T
C3a(Mouse Complement fragment 3a)ELISA Kit 小鼠補體片斷3a   Multi-class antibodies   規格：   48T
17-OHP(Mouse 17-Hydroxyprogesterone)ELISA Kit 小鼠17羥孕酮   Multi-class antibodies   規格：   48T
FS(Mouse Follistatin)ELISA Kit 小鼠卵泡抑素   Multi-class antibodies   規格：   48T
HD(Mouse Histone Deacetylase)ELISA Kit 小鼠組織蛋白去乙酰化酶   Multi-class antibodies   規格：   48T
E3(Mouse Estriol)ELISA Kit 小鼠雌三醇   Multi-class antibodies   規格：   48T
ASD(Mouse Androstenedione)ELISA Kit 小鼠雄烯二酮   Multi-class antibodies   規格：   48T
F-TESTO(Mouse Free Testoterone)ELISA Kit 小鼠游離睪酮   Multi-class antibodies   規格：   48T
T(Mouse Testoterone)ELISA Kit 小鼠睪酮   Multi-class antibodies   規格：   48T
PROG(Mouse Progesterone)ELISA Kit 小鼠孕激素/孕酮   Multi-class antibodies   規格：   48T
sRANKL(Mouse soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand)ELISA Kit 小鼠可溶核因子κB受體活化因子配基   Multi-class antibodies   規格：   48T
CT(Mouse Calcitonin)ELISA Kit 小鼠降鈣素   Multi-class antibodies   規格：   48T
ET-1(Mouse Endothelin 1)ELISA Kit 小鼠內皮素1   Multi-class antibodies   規格：   48T