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黑人Burkitt淋巴瘤細胞;RAJI培養

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所  在  地上海市

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更新時間:2017-01-20 13:16:26瀏覽次數:287次

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產品簡介

黑人Burkitt淋巴瘤細胞;RAJI培養細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。

詳細介紹

產品名稱黑人Burkitt淋巴瘤細胞;RAJI培養
貨期3-5天
發貨地上海

細胞名稱  黑人Burkitt淋巴瘤細胞;RAJI培養
形態特性   淋巴母細胞樣
生長特性  懸浮生長
特征特性   Raji細胞由Pulvertaft RJV于1963年從一位11歲黑人男孩的左上頜骨的Burkitt淋巴瘤中分離建立的,是*個人類造血系統的連續傳代細胞,為B細胞起源。該細胞中含有EBV,需要在*中操作;可作轉染宿主。 
培養條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   維持細胞濃度在4×105/ml~3×106/ml;根據細胞濃度每2~3天補液1次。
傳代情況  C5
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養法(-)
STR   Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D13S317:13;D16S539:8,11;D18S51:17;D19S433:14,14.2;D21S11:28,31;D2S1338:22;D3S1358:15,16;D5S818:10,13;D7S820:10;D8S1179:14,15;FGA:19,27;TH01:6,7;TPOX:8,13;vWA:16,19;
同工酶  
染色體   43~48
使用權限  A類

復蘇操作要點: 
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
KCNC1    英文名稱:    離子通道蛋白Kv3.1抗體    ?0.1ml
KLK11    英文名稱:    *11抗體    ?0.1ml
Kappa Light Chain    英文名稱:    k輕鏈抗體    ?0.1ml
KIST    英文名稱:    */*蛋白激酶KIST抗體(激酶相互作用與白血病相關基因)    ?0.2ml
KIF5A/NKHC1    英文名稱:    驅動蛋白KIF5A抗體    ?0.2ml
KCC2    英文名稱:    神經細胞鉀氯離子轉運蛋白抗體    ?0.1ml
KRAS    英文名稱:    原癌基因K-ras抗體    ?0.1ml
Kisspeptin    英文名稱:    腫瘤轉移抑制基因抗體    ?0.1ml
KLH    英文名稱:    血藍蛋白抗體    ?0.1ml
KCNG2    英文名稱:    心臟鉀離子通道蛋白亞基2抗體    ?0.2ml
KLHDC8A    英文名稱:    KLHDC8A蛋白抗體    ?0.2ml
Keratan Sulfate    英文名稱:    硫酸角質素抗體    ?0.2mlIL-1 Beta(Mouse Interleukin 1 Beta) ELISA Kit  小鼠白介素1β    Multi-class antibodies    規格:     48T
MYO/MB(Mouse Myoglobin) ELISA Kit  小鼠肌紅蛋白    Multi-class antibodies    規格:     48T
TXB2(Mouse Thromboxane B2) ELISA Kit  小鼠血栓素B2    Multi-class antibodies    規格:     48T
ACH(Mouse acetylcholine) ELISA Kit  小鼠乙酰*    Multi-class antibodies    規格:     48T
LTB4(Mouse Leukotriene B4) ELISA Kit  小鼠白三烯B4    Multi-class antibodies    規格:     48T
LIFR(Mouse leukemia inhibitory factor receptor) ELISA Kit  小鼠白血病抑制因子受體    Multi-class antibodies    規格:     48T
PF/PFP(Mouse Perforin/Pore-forming protein) ELISA Kit  小鼠穿孔素    Multi-class antibodies    規格:     48T
Synuclein mouse ELISA kit  小鼠突觸素    Multi-class antibodies    規格:     96T
mouse IgG ELISA kit  小鼠免疫球蛋白IgG    Multi-class antibodies    規格:     48T
mouse IgM ELISA kit  小鼠免疫球蛋白IgM    Multi-class antibodies    規格:     48T
mouse IgA ELISA kit  小鼠免疫球蛋白IgA    Multi-class antibodies    規格:     48T
IL-1 Beta (Rabbit Interleukin 1 Beta) ELISA Kit  兔白介素1β    Multi-class antibodies    規格:     96T

 

 


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