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人小細胞肺癌細胞;NCI-H209復蘇

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更新時間:2017-01-20 13:17:46瀏覽次數:204次

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產品簡介

人小細胞肺癌細胞;NCI-H209復蘇現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!

詳細介紹

產品名稱生長特性發貨地貨期
人小細胞肺癌細胞;NCI-H209復蘇貼壁生長上海3-5天

細胞名稱  人小細胞肺癌細胞;NCI-H209復蘇
形態特性   上皮樣
生長特性  懸浮聚集生長
特征特性   該細胞由Gazdar AF及其同事于1979年從一名小細胞肺癌患者的骨髓轉移灶中分離建立,該骨髓標本的獲取先于患者的治療。該細胞是一種典型的小細胞性肺癌細胞,表達較高水平的4種生化標志:神經特異性烯醇、肌酸激酶腦型同工酶、多巴脫羧酶、鈴蟾肽樣免疫活性。c-myc DNA序列沒有擴增;未發現大的結構DNA的異常;該細胞合成與正常肺相當量的p53 mRNA。該細胞以聚集體的形式懸浮生長,只有聚集體中的細胞是有活力的,但是細胞活率無法估計,一般培養基中含有大量的細胞碎片。該細胞表達異常的RB1蛋白,其706 
培養條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  20%FBS
傳代方法   1:2傳代;5~7天1次。
傳代情況  C5
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養法(-)
STR   Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11;D13S317:11;D16S539:9,12;D18S51:13;D19S433:14.2,15;D21S11:32.2;D2S1338:17,20;D3S1358:18,20;D5S818:12;D7S820:9;D8S1179:12,13;FGA:20,24;TH01:7,9;TPOX:8;vWA:18,19;
同工酶  
染色體   
使用權限  A類

來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
IL-10 (Rabbit Interleukin 10) ELISA Kit  兔白介素10    Multi-class antibodies    規格:     96T
TNF- Alpha (Rabbit Tumor necrosis factor Alpha) ELISA Kit  兔子腫瘤壞死因子α    Multi-class antibodies    規格:     96T
TGF- Beta (Rabbit Transforming Growth factor Beta) ELISA Kit  兔子轉化生長因子β    Multi-class antibodies    規格:     96T
bFGF (Rabbit basic fibroblast growth factor) ELISA Kit  兔子堿成纖維細胞生長因子    Multi-class antibodies    規格:     96T
PGE2 (Rabbit Prostaglandin E2) ELISA Kit  兔子前列腺素E2    Multi-class antibodies    規格:     96T
5-HT (Rabbit 5-Hydroxytryptamine) ELISA Kit  兔子5羥色胺    Multi-class antibodies    規格:     96T
Beta-EP (Rabbit Beta-Endorphin) ELISA Kit  兔子β內啡肽    Multi-class antibodies    規格:     96T
NF-κB p65 (Rabbit nuclear factor-κB p65) ELISA Kit  兔核因子κB亞基p65親和肽    Multi-class antibodies    規格:     96T
G-CSF (Rabbit Granulocyte Colony Stimulating Factor) ELISA Kit  兔粒細胞集落刺激因子    Multi-class antibodies    規格:     96TKLF13    英文名稱:    腸道內富含的Kruppel樣因子13    ?0.1ml
ZFP103    英文名稱:    鋅指蛋白103抗體    ?0.2ml
KGF    英文名稱:    纖維母細胞生長因子7抗體    ?0.1ml
KLF2    英文名稱:    肺Kruppel樣因子抗體    ?0.1ml
KLK5    英文名稱:    *5抗體    ?0.1ml
KLK13    英文名稱:    *13抗體    ?0.1ml
KLK15    英文名稱:    *15抗體    ?0.2ml
KLK2    英文名稱:    *2抗體    ?0.1ml
KLK12    英文名稱:    *12抗體    ?0.1ml
KiSS1 receptor    英文名稱:    G蛋白偶聯受體54抗體    ?0.1ml
KIF17    英文名稱:    驅動蛋白家族KIF17抗體    ?0.2ml
KLF9    英文名稱:    轉錄因子KLF9抗體    ?0.1ml

 

 


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