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人前列腺癌細胞;LNCaP特性

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更新時間:2017-01-20 13:19:53瀏覽次數:200次

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產品簡介

人前列腺癌細胞;LNCaP特性,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!

詳細介紹

人前列腺癌細胞;LNCaP特性來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。

產品名稱生長特性發貨地貨期
人前列腺癌細胞;LNCaP特性貼壁生長上海3-5天

細胞名稱  
形態特性   上皮樣;梭形
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細胞由Horoszewicz JS于1977年從一名50歲的明確診斷為轉移性前列腺癌的白人男性患者的左鎖骨上淋巴結細針穿刺的活體組織中分離建立的。5-α-雙氫睪酮可影響該細胞的生長和酸性磷酸酶的產生。該細胞不形成均一的單層而是成簇生長,所以傳代的時候要反復吹打形成單個細胞;該細胞貼壁不牢,達不到匯合狀態,而且會使培養基迅速變酸;傳代后48h內一定要保持培養瓶靜止.如果此時挪動培養瓶,會使大部分細胞從瓶底脫落。如果出現此種情況,需要重新孵育24~48h使細胞重新貼壁,細胞貼壁后可更換培養基。 
培養條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   1:3~1:6傳代;5~7天1次。
傳代情況  P50
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養法(-)
STR   Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,11;D13S317:10,12;D16S539:11;D18S51:9,11,12;D19S433:13.2,15;D21S11:29,32.2;D2S1338:16,17;D3S1358:16;D5S818:11,12;D7S820:8.1,9.1,10.3;D8S1179:12,14;FGA:19,20;TH01:9;TPOX:8,9;vWA:16,18;
同工酶  
染色體   72~88,XY
使用權限  A類

細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
LF/LTF (Rabbit Lactoferrin) ELISA Kit  兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白    Multi-class antibodies    規格:     96T
c (Rabbit cardiac isoform of Tropnin T) ELISA Kit  兔心肌特異肌鈣蛋白T    Multi-class antibodies    規格:     96T
LZM (Rabbit Lysozyme) ELISA Kit  兔*    Multi-class antibodies    規格:     96T
PRL (Rabbit prolactin) ELISA Kit  兔子催乳素    Multi-class antibodies    規格:     96T
LH (Rabbit luteotropic hormone) ELISA Kit  兔子促黃體激素    Multi-class antibodies    規格:     96T
ABAb (Rabbit anti-brain tissue antibody) ELISA Kit  兔抗腦組織抗體    Multi-class antibodies    規格:     96T
p53 (Rabbit p53/tumor protein) ELISA Kit  兔p53    Multi-class antibodies    規格:     96T
BAX (Rabbit Bcl-2 Assaciated X protein) ELISA Kit  兔Bcl-2相關X蛋白    Multi-class antibodies    規格:     96T
ADR (Rabbit adramycin) ELISA Kit  兔*    Multi-class antibodies    規格:     96T
MMP-2/Gelatinase A (Rabbit matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A) ELISA Kit  兔基質金屬蛋白酶2/明膠酶A    Multi-class antibodies    規格:     96T
OSM (Rabbit Oncostatin-M) ELISA Kit  兔抑瘤素M    Multi-class antibodies    規格:     96T
ANG-2 (Rabbit Angiopoietin 2) ELISA Kit  兔血管生成素2    Multi-class antibodies    規格:     96T
ANG- II (Rabbit angiotension II ) ELISA Kit  兔血管緊張素Ⅱ    Multi-class antibodies    規格:     96T
sFAS/Apo-1 (Rabbit soluble Factor-related Apoptosis) ELISA Kit  兔可溶凋亡相關因子    Multi-class antibodies    規格:     96TKIFC1    英文名稱:    驅動蛋白家族成員C1抗體    ?0.2ml
KLHL22    英文名稱:    Kelch樣蛋白22抗體    ?0.2ml
KCND1    英文名稱:    電壓門控鉀通道Kv4.1抗體    ?0.2ml
KCNK3    英文名稱:    酸敏感鉀離子通道蛋白3抗體    ?0.1ml
Klotho    英文名稱:    Klotho多肽蛋白抗體    ?0.1ml
KCNN4    英文名稱:    鈣激活鉀通道蛋白4抗體    ?0.1ml
KLHL23    英文名稱:    Kelch樣蛋白23抗體    ?0.2ml
KBTBD10    英文名稱:    BTB-kelch蛋白家族10抗體    ?0.2ml
KBTBD4    英文名稱:    BTB-kelch蛋白家族4抗體    ?0.2ml
KLHL24    英文名稱:    Kelch樣蛋白24抗體    ?0.2ml

 

 


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