【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人腎癌Wilms細胞；G401培養
形態特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞來源于一名3個月大的嬰兒的腎Wilms瘤，由于該類腫瘤分類的改變，經Garvin等鑒定后發現該細胞來源于腎橫紋肌樣瘤。該細胞分泌腎母細胞生長因子（nephroblast growth factor，NB-GF)。
培養條件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代；3~4天1次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法（-）
STR Amelogenin：X，Y；CSF1PO：11，13；D13S317：9，14；D16S539：12；D18S51：14；D19S433：13，14；D21S11：31，32.2；D2S1338：18，24；D3S1358：16，18；D5S818：13；D7S820：11，14；D8S1179：13，14；FGA：24，27；TH01：8，9.3；TPOX：8，11；vWA：16；
同工酶
染色體 亞二倍體，XY
使用權限 A類
復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
LIX1 英文名稱： LIX1抗體 ?0.2ml
LOX 1 英文名稱： 凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體抗體 ?0.1ml
MD1 英文名稱： MD-1蛋白抗體 ?0.1ml
MD-2 英文名稱： MD-2蛋白抗體 ?0.1ml
LYVE-1 英文名稱： 淋巴管內皮透明質酸受體抗體 ?0.1ml
liver FABP 英文名稱： 肝臟型脂肪酸結合蛋白抗體 ?0.2ml
Luciferase 英文名稱： 熒光素酶抗體 ?0.2ml
LAP3 英文名稱： *氨基肽酶3抗體 ?0.1ml
LFABP/FABP-1 英文名稱： 肝臟型脂肪酸結合蛋白抗體 ?0.2ml
LPP2 英文名稱： 腫瘤抑制基因LPP2抗體 ?0.2mlPV ELISA Kit 魚卵黃高磷蛋白 Multi-class antibodies 規格： 48T
MHC ELISA Kit 魚類主要組織相容復合體 Multi-class antibodies 規格： 48T
C3 ELISA Kit 鮭魚補體蛋白3 Multi-class antibodies 規格： 48T
C4 ELISA Kit 鮭魚補體蛋白4 Multi-class antibodies 規格： 48T
IL-1 Alpha ELISA kit 魚類白介素1α Multi-class antibodies 規格： 48T
IL-1 Beta ELISA Kit 魚類白介素1β Multi-class antibodies 規格： 48T
VTG ELISA Kit 鯉魚卵黃蛋白原 Multi-class antibodies 規格： 96T
GnRH ELISA Kit 魚類促腺激素釋放激素 Multi-class antibodies 規格： 48T
Fish Tri-iodothyronine,T3 ELISA Kit 魚類三碘甲狀腺原氨酸 Multi-class antibodies 規格： 48T
Fish Cortisol ELISA Kit 魚類* Multi-class antibodies 規格： 48T
Fish high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit 魚類超敏C反應蛋白 Multi-class antibodies 規格： 48T
