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上海撫生實業(yè)有限公司


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人肺腺癌細胞;Calu-3復蘇

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產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)代理商

所  在  地上海市

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更新時間:2017-01-20 13:27:17瀏覽次數(shù):151次

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產(chǎn)品簡介

人肺腺癌細胞;Calu-3復蘇現(xiàn)貨供應,質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!

詳細介紹

人肺腺癌細胞;Calu-3復蘇來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。

產(chǎn)品名稱生長特性發(fā)貨地貨期
人肺腺癌細胞;Calu-3復蘇貼壁生長上海3-5天

細胞名稱  
形態(tài)特性   上皮樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細胞是從一名25歲的白人男性肺腺癌患者的胸水中分離建立的;該患者曾使用過*、*、*進行治療。該細胞接種至裸鼠可成瘤;可作轉(zhuǎn)染宿主。 
培養(yǎng)條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法   1:3~1:6傳代;每周2~3次。
傳代情況  C5
凍存條件   基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養(yǎng)法(-)
STR   Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:12;D16S539:12,14;D18S51:14,17;D19S433:12,13;D21S11:28,30;D2S1338:19;D3S1358:15,18;D5S818:11;D7S820:10,11;D8S1179:11,15;FGA:25;TH01:6,9.3;TPOX:8;vWA:16,17;
同工酶  
染色體   56~63,XX,有若干染色體易位
使用權(quán)限  A類

細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
Fish Oste ocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA kit  魚骨鈣素/骨*蛋白    Multi-class antibodies    規(guī)格:     48T
Cherax quadricarinatus lipovilin/vilin,Lv/Vn ELISA Kit   紅螯光殼螯蝦卵黃脂磷蛋白/卵黃磷蛋白    Multi-class antibodies    規(guī)格:     48T
Macrobrachium rosenbergii Nodavirus,MrNV ELISA Kit  羅氏沼蝦諾達病毒    Multi-class antibodies    規(guī)格:     48T
Cobra venom factor,CVF ELISA Kit  毒蛇因子    Multi-class antibodies    規(guī)格:     48T
bullfrog growth hormone,GH ELISA Kit  牛蛙生長激素    Multi-class antibodies    規(guī)格:     48T
Bombyx mori Livetin,LT ELISA Kit  家蠶卵黃蛋白    Multi-class antibodies    規(guī)格:     48T
Nasoniavitripennis vilogenin,Vtg ELISA Kit  蝶蛹金小蜂卵黃蛋白原    Multi-class antibodies    規(guī)格:     48T
Plant phosphatidylglycerol,PG ELISA Kit  植物磷脂酰甘油    Multi-class antibodies    規(guī)格:     48TLATS1    英文名稱:    腫瘤抑制基因LATS1抗體    ?0.2ml
Phospho-LIMK1(Thr508) + LIMK2(Thr505)    英文名稱:    磷酸化單*蛋白激酶1/2抗體    ?0.1ml
Phospho-LATS1 (Ser909)    英文名稱:    磷酸化腫瘤抑制基因LATS1抗體    ?0.1ml
phospho-LKB1(Ser334)    英文名稱:    磷酸化*/*蛋白激酶抗體    ?0.1ml
phospho-LKB1(Ser428)    英文名稱:    磷酸化*/*蛋白激酶抗體    ?0.1ml
Phospho-LKB1(Thr189)    英文名稱:    磷酸化*/*蛋白激酶抗體    ?0.1ml
GNRH    英文名稱:    黃體激素釋放激素類似物抗體    ?0.1ml
Phospho-Lamin A + C(Ser22)    英文名稱:    磷酸化核纖層蛋白A/C抗體    ?0.1ml
Phospho-Lck (Tyr505)    英文名稱:    磷酸化淋巴細胞特異蛋白*激酶抗體    ?0.1ml
Lyn    英文名稱:    膜相關蛋白*激酶Lyn抗體    ?0.2ml
Phospho-Lyn (Tyr507)    英文名稱:    磷酸化膜相關蛋白*激酶Lyn抗體    ?0.1ml
Phospho-Lyn (Tyr397)    英文名稱:    磷酸化膜相關蛋白*激酶Lyn抗體    ?0.1ml

 

 


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