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人皮膚黑色素瘤細(xì)胞；SK-MEL-1特性

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產(chǎn)品簡介

人皮膚黑色素瘤細(xì)胞；SK-MEL-1特性，質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好，同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明，歡迎前來選購！

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品名稱	生長特性	發(fā)貨地	貨期
人皮膚黑色素瘤細(xì)胞；SK-MEL-1特性	貼壁生長	上海	3－5天

細(xì)胞名稱 人皮膚黑色素瘤細(xì)胞；SK-MEL-1特性
形態(tài)特性   球形
生長特性懸浮生長
特征特性   該細(xì)胞由Oettgen F及其同事從一名29歲的患有廣泛、快速進(jìn)展性惡性黑色素瘤的白人男性患者的胸導(dǎo)管中分離建立的。該細(xì)胞可產(chǎn)生黑色素，電鏡檢測發(fā)現(xiàn)細(xì)胞中色素顆粒與自身合成和吞噬作用相關(guān)。在63%的惡性黑色素瘤患者和10%其他疾病患者體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了針對該細(xì)胞系的抗體。
培養(yǎng)條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法   維持細(xì)胞濃度在1×105~2×105,每周補(bǔ)液2~3次。
傳代情況 C5
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測培養(yǎng)法（-）
STR   Amelogenin：X，Y；CSF1PO：12，13；D13S317：11；D16S539：11，12；D18S51：13，16；D19S433：15，16.2；D21S11：29，32.2；D2S1338：19，23；D3S1358：14，16；D5S818：12，13；D7S820：12；D8S1179：16；FGA：18，20；TH01：6；TPOX：11；vWA：16，17；
同工酶
染色體   53~73，XY
使用權(quán)限 A類

來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
Anti-c-Abl /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠非受體*激酶c-Abl抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-ABL2/FITC 熒光素標(biāo)記ABL2抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-ACA11 /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗擬南芥ACA11抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-AHA3 /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗植物蛋白AHA3抗體（擬南芥）IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-ABP/FITC 熒光素標(biāo)記雄激素結(jié)合蛋白抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-Rat IgA/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗大鼠IgA抗體   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-ABI1/SSH3BP1/FITC 熒光素標(biāo)記ABI1/SSH3BP1蛋白抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-ACD/PTOP/FITC 熒光素標(biāo)記腎上腺皮質(zhì)發(fā)育異常蛋白抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-ACE1/FITC 熒光素標(biāo)記血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-ACE2/FITC 熒光素標(biāo)記血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-ACEI/FITC 熒光素標(biāo)記血管緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-Acetyl CoA Carboxylase/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、猴、牛乙酰*羧化酶抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2mlLamin B2   英文名稱：   核纖層蛋白B2抗體   ?0.2ml
Laminin alpha 5   英文名稱：   層粘蛋白α5抗體   ?0.1ml
L-Citrulline   英文名稱：   L-瓜氨酸抗體   ?0.2ml
LACE1   英文名稱：   泌乳升高蛋白1抗體   ?0.2ml
LAPTM4A   英文名稱：   溶酶體相關(guān)膜蛋白4α抗體   ?0.2ml
DIF14   英文名稱：   分化相關(guān)基因14抗體   ?0.2ml
LACTB2   英文名稱：   β內(nèi)酰胺酶樣蛋白2抗體   ?0.2ml
LRFN3   英文名稱：   神經(jīng)突觸粘附樣分子4抗體   ?0.2ml
LGALS3BP   英文名稱：   可溶半乳糖凝集素3結(jié)合蛋白抗體   ?0.2ml
Leptin   英文名稱：   瘦素抗體   ?0.1ml
Lipin 1   英文名稱：   磷脂酸磷酸酯酶LPIN1抗體   ?0.2ml