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人腦瘤細(xì)胞；SF767培養(yǎng)

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

人腦瘤細(xì)胞；SF767培養(yǎng)細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。

詳細(xì)介紹

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱 人腦瘤細(xì)胞；SF767培養(yǎng)
形態(tài)特性   多角
生長(zhǎng)特性貼壁生長(zhǎng)
特征特性
培養(yǎng)條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代；3~4天1次。
傳代情況 C5
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR   Amelogenin：X；CSF1PO：11；D13S317：11，13；D16S539：12，13；D18S51：12；D19S433：13，15.2；D21S11：30，31；D2S1338：18；D3S1358：16；D5S818：12；D7S820：9，10；D8S1179：14；FGA：23；TH01：8，9.3；TPOX：8，10；vWA：15，17；
同工酶
染色體   45~64
使用權(quán)限 A類

產(chǎn)品名稱	人腦瘤細(xì)胞；SF767培養(yǎng)
貨期	3－5天
發(fā)貨地	上海

復(fù)蘇操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
LGR6   英文名稱：   G蛋白偶聯(lián)受體6抗體   ?0.2ml
Lambda Light Chain   英文名稱：   λ輕鏈抗體   ?0.1ml
LAMP2   英文名稱：   溶酶體相關(guān)膜蛋白2抗體   ?0.1ml
LAS2   英文名稱：   肺腺瘤易感蛋白2抗體   ?0.2ml
phospho-LEO1(Ser551)   英文名稱：   磷酸化RNA聚合酶相關(guān)蛋白LEO1抗體   ?0.1ml
LATS2   英文名稱：   腫瘤抑制基因LATS2抗體   ?0.2ml
phospho-LSP1 (Ser204)   英文名稱：   磷酸化白細(xì)胞F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體   ?0.1ml
phospho-LATS2 (Ser83)   英文名稱：   磷酸化腫瘤抑制基因LATS2抗體   ?0.1ml
phospho-LSP1 (Ser252)   英文名稱：   磷酸化白細(xì)胞F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體   ?0.1ml
LSP1   英文名稱：   白細(xì)胞F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體   ?0.2mlAnti-Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、猴、牛磷酸化乙酰*羧化酶抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-AchE/FITC 熒光素標(biāo)記乙酰*酶抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-CHRNA2/FITC 熒光素標(biāo)記煙堿型乙酰*受體A2(神經(jīng)型)抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti- Beta-Actin/Gold 金標(biāo)記β-肌動(dòng)蛋白抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-Acinus L/S/FITC 熒光素標(biāo)記腺泡Acinus L/S抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-Acinus(phospho S1180)/FITC 熒光素標(biāo)記腺泡磷酸化Acinus抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-Ack1/FITC 熒光素標(biāo)記Ack1抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-Ack1(Phospho-Tyr284) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化Ack1抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-Phospho-Ack1(Tyr857/858) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、小鼠磷酸化Ack1抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-Phospho-Ack1(Tyr326) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化Ack1抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-ACTH 1-39/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠ACTH抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-ACTH(7-23)/FITC 熒光素標(biāo)記促腎上腺皮質(zhì)激素(7-23)抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml