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人神經母細胞瘤細胞;BE(2)-M17復蘇

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更新時間:2017-01-20 13:50:56瀏覽次數:225次

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產品簡介

人神經母細胞瘤細胞;BE(2)-M17復蘇現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!

詳細介紹

人神經母細胞瘤細胞;BE(2)-M17復蘇來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。

細胞名稱  人神經母細胞瘤細胞;BE(2)-M17復蘇
形態(tài)特性   神經母細胞樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細胞系源自一位2歲患有神經母細胞瘤男童的骨髓,是SK-N-BE(2)神經母細胞瘤的一個克??;細胞多層生長,隨著培養(yǎng)時間細胞會聚集、漂浮。 
培養(yǎng)條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法   1:20~1:50傳代;每4~7天換液1次。
傳代情況  C5
凍存條件   基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養(yǎng)法(-)
STR   Amelogenin:X;CSF1PO:10;D13S317:11;D16S539:9,11;D18S51:16,26;D19S433:12,13;D21S11:30,32.2;D2S1338:23;D3S1358:19;D5S818:12;D7S820:9,10;D8S1179:13,14;FGA:22,25;TH01:6;TPOX:11;vWA:18;
同工酶  
染色體   
使用權限  A類

產品名稱生長特性發(fā)貨地貨期
人神經母細胞瘤細胞;BE(2)-M17復蘇貼壁生長上海3-5天

人神經母細胞瘤細胞;BE(2)-M17復蘇細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
人神經母細胞瘤細胞;BE(2)-M17復蘇操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
 ? Phospho-5-Lipoxygenase(Ser524)    英文名稱:    磷酸化5-脂氧合酶抗體    ?0.1ml
LMP2    英文名稱:    低分子質量蛋白2抗體    ?0.1ml
LIMK1    英文名稱:    單*蛋白激酶1抗體    ?0.1ml
LMP7    英文名稱:    低分子量蛋白酶體7抗體    ?0.2ml
LH    英文名稱:    促黃體生成素抗體    ?0.1ml
Laminin alpha 1    英文名稱:    層粘蛋白α1抗體    ?0.1ml
LETM1    英文名稱:    LETM1蛋白抗體    ?0.1ml
LDHA    英文名稱:    乳酸脫氫酶抗體    ?0.1ml
phospho-LKB1 (Thr363)    英文名稱:    磷酸化*/*蛋白激酶抗體    ?0.1ml
Laminin Beta 1    英文名稱:    層粘連蛋白β1抗體    ?0.2ml
LPLUNC1    英文名稱:    鼻咽癌癌基因抗體    ?0.1mlAnti-Annexin III /FITC  熒光素標記膜粘連蛋白 Ⅲ抗體IgG    Multi-class antibodies    規(guī)格:     0.2ml
Anti-Annexin IV /FITC  熒光素標記膜粘連蛋白 Ⅳ抗體IgG    Multi-class antibodies    規(guī)格:     0.2ml
Anti-Annexin V/FITC  熒光素標記重組膜粘連蛋白-5(人)抗體IgG    Multi-class antibodies    規(guī)格:     0.2ml
Anti-Annexin VI/FITC  熒光素標記膜粘連蛋白 VI抗體IgG    Multi-class antibodies    規(guī)格:     0.2ml
Anti-Anopheles stephensi protein 1/FITC  熒光素標記按蚊抗體IgG    Multi-class antibodies    規(guī)格:     0.2ml
Anti-ANP/FITC  熒光素標記抗心鈉肽(心鈉素)抗體IgG    Multi-class antibodies    規(guī)格:     0.2ml
Anti-Anthrax/FITC  熒光素標記炭疽菌抗體IgG    Multi-class antibodies    規(guī)格:     0.2ml
Anti-Anthrax/FITC  熒光素標記炭疽菌抗體(采用活疫苗制備)IgG    Multi-class antibodies    規(guī)格:     0.2ml
Anti-ANXA1(Annexin A1)/FITC  熒光素標記膜粘連蛋白A1抗體IgG    Multi-class antibodies    規(guī)格:     0.2ml
Anti-AP/ALP/FITC   熒光素標記抗堿磷酸酶抗體IgG    Multi-class antibodies    規(guī)格:     0.2ml
人神經母細胞瘤細胞;BE(2)-M17復蘇Anti-beta Adaptin/AP2/FITC  熒光素標記銜接蛋白β抗體IgG    Multi-class antibodies    規(guī)格:     0.2ml
Anti- Gamma-Adaptin/FITC  熒光素標記銜接蛋白γ抗體IgG    Multi-class antibodies    規(guī)格:     0.2ml

 

 


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