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上海撫生實業有限公司
人肝癌細胞;SMMC-7721復蘇現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!
人肝癌細胞;SMMC-7721復蘇來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
產品名稱 | 生長特性 | 發貨地 | 貨期 |
人肝癌細胞;SMMC-7721復蘇 | 貼壁生長 | 上海 | 3-5天 |
細胞名稱
形態特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 取人肝癌組織,采用靜置和旋轉管法培養11天細胞開始生長,*傳代23天。AFP陽性。用Northern blot方法,未能檢測到細胞中1.3kb LFIRE-1/HFREP-1 mRNA的表達,免疫缺陷小鼠體內可成瘤。STR檢測發現SGC7901、SMMC7721、QGY7701、QGY7703、QSG7701、Ho-8910PM、Ho-8910、BEL7402、SMMC7721等多株細胞為同一遺傳背景,懷疑彼此間存在交叉污染。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10;D13S317:13.3,15.1;D16S539:9,10;D18S51:16;D19S433:13;D21S11:27,28;D2S1338:17;D3S1358:15,18;D5S818:11,12;D7S820:12;D8S1179:12;FGA:18,21;TH01:7;TPOX:12;vWA:16,18;
同工酶
染色體 52~56
使用權限 A類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
MSH γ1 英文名稱: 促黑細胞激素γ1抗體 ?0.2ml
PKM2 英文名稱: 小鼠抗丙酮酸激酶-M2抗體 ?0.1ml
PABP (Methyl Arg455/460) 英文名稱: 甲基化多聚腺苷酸結合蛋白抗體 ?0.1ml
MIG6 英文名稱: 有絲分裂原誘導基因6抗體 ?0.2ml
Mitofusin 2 英文名稱: 線粒體融合蛋白Mfn2抗體 ?0.1ml
Mammaglobin A 英文名稱: 珠蛋白1抗體 ?0.2ml
MYL9 英文名稱: 肌球蛋白輕鏈9抗體 ?0.1ml
phospho-MYL9(Thr19) 英文名稱: 磷酸化肌球蛋白輕鏈9抗體 ?0.1ml
MT-ND1 英文名稱: NADH復合體1抗體 ?0.2ml
MUC1 英文名稱: 癌相關抗原抗體 ?0.1mlAnti-B Raf(phospho S365) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化B-Raf抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-phospho-B-Raf (Ser445)/FITC 熒光素標記磷酸化B-Raf抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-phospho-B-Raf (Ser601) /FITC 熒光素標記磷酸化B-Raf抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-BRCA1(human)/FITC 熒光素標記癌易感基因1抗體(人)IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-BRCA1(mouse rat)/FITC 熒光素標記癌易感基因1抗體(小鼠 大鼠)IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-BRCA1(Phospho Ser1524) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化癌易感基因1抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-BRCA2/FITC 熒光素標記癌易感基因2抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-BrdU/FITC(Bromodeoxyuridine) 熒光素標記兔抗溴脫氧尿苷抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-BrdU/FITC 熒光素標記溴脫氧尿苷抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-SMARCA4/SNF2 beta/FITC 熒光素標記抑癌基因SNF2β抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-BRMS-1/FITC 熒光素標記癌轉移抑制基因1抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-BTG2/TIS21/FITC 熒光素標記B細胞遷移基因2抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-Brucella/FITC 熒光素標記抗布魯氏菌抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-Brucella/HRP 辣根過氧化物酶標記抗布魯氏菌抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
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