【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人非小細胞肺腺癌細胞；NCI-H157復蘇
形態特性 多角
生長特性 貼壁生長
特征特性
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS；10mM Hepes+1mM丙銅酸鈉
傳代方法 1:3傳代；5~7天1次。
傳代情況 P86
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法（-）
STR Amelogenin：X；CSF1PO：12；D13S317：12；D16S539：12，13；D18S51：13，15；D19S433：11，13；D21S11：32；D2S1338：21，22；D3S1358：17，18；D5S818：10，13；D7S820：12；D8S1179：14，16；FGA：22，23；TH01：7，9；TPOX：6，12；vWA：15；
同工酶
染色體 49~54
使用權限 A類
復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
Anti-CCRK/FITC 熒光素標記細胞周期相關激酶抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-CD2/FITC 熒光素標記CD2抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-CD2AP/FITC 熒光素標記白細胞分化抗原CD2AP抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-SLAMF9/CD2F-10/FITC 熒光素標記CD2F-10抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-SLAMF9/CD2F-10/FITC 熒光素標記CD2F-10抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-CD3/FITC 熒光素標記CD3蛋白抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-CD3/RBITC 紅色熒光素羅丹明標記CD3抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-CD3/PE 熒光素PE標記CD3抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-CD4/FITC 熒光素標記CD4蛋白抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-CD4/RBITC 紅色熒光素羅丹明(RBITC)標記CD4抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2mlhospho-MYL6(Tyr29+Ser30) 英文名稱： 磷酸化肌球蛋白輕鏈6抗體 ?0.1ml
phospho-P38 MAPK (Thr180) 英文名稱： 磷酸化p38MAPK抗體 ?0.1ml
phospho-p38 MAPK (Tyr323) 英文名稱： 磷酸化p38MAPK抗體 ?0.1ml
phospho-MEF2C(Ser396) 英文名稱： 磷酸化肌細胞增強因子2C抗體 ?0.1ml
phospho-MAPK8 ( Thr183 + Tyr185) 英文名稱： 磷酸化氨基末端激酶2抗體 ?0.1ml
MELK 英文名稱： 蛋白激酶MPK38抗體 ?0.2ml
MGST1 英文名稱： 微粒體*S轉移酶1抗體 ?0.2ml
MUC13 英文名稱： 粘蛋白13抗體 ?0.2ml
MEPE 英文名稱： 細胞外基質磷酸化抗體 ?0.2ml
Mast Cell Tryptase 英文名稱： 肥大細胞蛋白酶7抗體 ?0.1ml
MAP4 英文名稱： 微管相關蛋白4抗體 ?0.1ml
