【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人胰腺腺泡上皮癌；HPAC使用說明書
形態特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3~1:6傳代，3~4天換液1次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法（-）
STR Amelogenin：X；CSF1PO：13；D13S317：11；D16S539：9，10；D18S51：16；D19S433：14；D21S11：30；D2S1338：19，23；D3S1358：15，17；D5S818：12；D7S820：10，12；D8S1179：12，14；FGA：24；TH01：9.3；TPOX：10，11；vWA：15，17；
同工酶
染色體
使用權限 B類
復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
pMSS1 英文名稱： 26S蛋白酶調節亞型7抗體 ?0.1ml
MEG1 英文名稱： 蛋白*磷酸酶非受體型4抗體 ?0.1ml
MBOAT4 英文名稱： 腦腸肽O酰基轉移酶抗體 ?0.2ml
MRG15 英文名稱： 轉錄調控因子MRG15抗體 ?0.2ml
MLL5 英文名稱： 髓系/淋巴混合譜系白血病蛋白5抗體 ?0.2ml
MPV17 英文名稱： T淋巴細胞成熟相關蛋白抗體 ?0.2ml
cblA 英文名稱： 甲基丙二酸尿癥cblA抗體 ?0.2ml
non-muscle Myosin IIA 英文名稱： 非平滑肌肌球蛋白2A抗體 ?0.1ml
MMS19 英文名稱： DNA修復甲基磺酸敏感基因19抗體 ?0.2ml
C19orf28 英文名稱： 19號染色體開放閱讀框28抗體 ?0.2mlAnti-CD4/PE 熒光素PE標記CD4抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-CD5/FITC 熒光素標記CD5抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-CD5L/Api6/FITC 熒光素標記CD5L抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-CD6/TP120/FITC 熒光素標記CD6抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-CD7/FITC 熒光素標記抗CD7抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-CD8/FITC 熒光素標記CD8蛋白抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-CD9/MRP-1/FITC 熒光素標記CD9抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-CD10/CALLA/FITC 熒光素標記CD10抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-CD13/FITC 熒光素標記氨肽酶N抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-CD14/FITC 熒光素標記CD14蛋白抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-CD17/FITC 熒光素標記CD17抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-CD18/LFA-1/FITC 熒光素標記白細胞粘附蛋白抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-CD19/FITC 熒光素標記CD19抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
