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上海撫生實業有限公司
人結直腸腺癌細胞;SW620 [SW 620;SW-620]培養細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。
產品名稱 | 人結直腸腺癌細胞;SW620 [SW 620;SW-620]培養 |
貨期 | 3-5天 |
發貨地 | 上海 |
細胞名稱 人結直腸腺癌細胞;SW620 [SW 620;SW-620]培養
形態特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 SW480源自一位51歲白人男性患者的原位直腸腺癌,而SW620源自同一病人一年后的淋巴結轉移灶,由Leibovitz A等建系。該細胞系主要由單個的小圓球細胞和無微絨毛的雙極細胞組成。它僅合成少量癌胚抗原(CEA,0.15 ng/106 cells/10 days),且在裸鼠中有高度的致瘤性;可合成TGFα和matrilysin;角蛋白陽性,CSAp和結腸抗原3陰性;表達c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis、fos,未檢測到N-myc的表達。P53基因273位密碼子存在G→A突
培養條件 L15: Leibovitz Medium 10%FBS
傳代方法 1:2~1:10傳代;2~3天換液1次。
傳代情況 P42
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:13,14;D13S317:12;D16S539:9,13;D18S51:13;D19S433:13;D21S11:30,30.2;D2S1338:24;D3S1358:15,16;D5S818:13;D7S820:8,9;D8S1179:13;FGA:24;TH01:8;TPOX:11;vWA:16;
同工酶
染色體 48~51,XY
使用權限 A類
人結直腸腺癌細胞;SW620 [SW 620;SW-620]培養復蘇操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
人結直腸腺癌細胞;SW620 [SW 620;SW-620]培養操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
RNF61 英文名稱: 環指蛋白61抗體 ?0.2ml
Muscarinic Acetylcholine receptor M3 英文名稱: 毒蕈堿型乙酰*受體M3抗體 ?0.1ml
MLH1 英文名稱: 錯配修復蛋白1抗體 ?0.1ml
Angiotensin II Type 2 Receptor 英文名稱: 血管緊張素Ⅱ2型受體相互作用蛋白抗體 ?0.1ml
MARCO 英文名稱: 巨噬細胞清道夫受體抗體 ?0.2ml
Myf6 英文名稱: 生肌調節因子6抗體 ?0.2ml
MBD1 英文名稱: 甲基化CpG結合蛋白抗體 ?0.1ml
Morphine (C1F3) 英文名稱: *單克隆抗體 ?0.1ml
Morphine(2F11) 英文名稱: *單克隆抗體 ?0.1ml
MAS1 英文名稱: GTP結合蛋白MAS1抗體 ?0.1ml
MAG 英文名稱: 髓鞘相關糖蛋白-a抗體 ?0.1ml
MAGE-1 英文名稱: 黑色素瘤相關抗原抗體 ?0.1mlAnti-CDK3 /FITC 熒光素標記周期素依賴激酶3抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CDK4/FITC 熒光素標記周期素依賴激酶4抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CDK5/FITC 熒光素標記周期素依賴激酶5抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CDK6/FITC 熒光素標記周期素依賴激酶6抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CDK7/Cyclin H/MAT1 /FITC 熒光素標記周期素依賴激酶7抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
人結直腸腺癌細胞;SW620 [SW 620;SW-620]培養Anti-CDK8/FITC 熒光素標記周期素依賴激酶8抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CDK9/FITC 熒光素標記周期素依賴激酶9抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
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