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人胃腺癌細胞;SGC-7901 SGC7901使用說明書

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更新時間:2017-01-20 14:52:08瀏覽次數:271次

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產品簡介

人胃腺癌細胞;SGC-7901 [SGC7901]使用說明書細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。

詳細介紹

【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療

產品名稱人胃腺癌細胞;SGC-7901 [SGC7901]使用說明書
貨期3-5天
發貨地上海

胞名稱  人胃腺癌細胞;SGC-7901 [SGC7901]使用說明書
形態特性   上皮樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   1979年建系;這株細胞源自一位56歲女性胃腺癌患者的淋巴結轉移灶。RPMI-1640培養12天,細胞開始生長,*傳代10天;31個月中傳代186代。免疫抑制的ICR小鼠、乳犬皮下移植成功,家兔、乳犬眼前房移植成功;淋巴結轉移,從小鼠皮下侵襲至肌層。STR檢測發現SGC7901、SMMC7721、QGY7701、QGY7703、QSG7701、Ho-8910PM、Ho-8910、BEL7402、SMMC7721等多株細胞為同一遺傳背景,懷疑彼此間存在交叉污染。 
培養條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代;2~3天1次。
傳代情況  C5
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養法(-)
STR   Amelogenin:X;CSF1PO:10;D13S317:13.3;D16S539:9,10;D18S51:16;D19S433:13;D21S11:27,28;D2S1338:17;D3S1358:15,18;D5S818:11,12;D7S820:12;D8S1179:12;FGA:18,21;TH01:7;TPOX:12;vWA:16,18;
同工酶  
染色體   60~82
使用權限  A類

人胃腺癌細胞;SGC-7901 [SGC7901]使用說明書復蘇操作要點: 
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
人胃腺癌細胞;SGC-7901 [SGC7901]使用說明書操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
AAnti-Cortactin/FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠皮層肌動蛋白抗體IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-Cortactin (phospho Tyr466) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化皮層肌動蛋白抗體IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-COLEC12/CL-P1/FITC  熒光素標記凝集胎盤蛋白1抗體IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-Glycodelin A/PP14/FITC  熒光素標記胎盤蛋白14抗體IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-Clusterin- Alpha/ Beta /FITC  熒光素標記凝聚素α/β抗體IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-C-Myc/HRP (MYC/MTLC)  辣根過氧化物酶標記致癌基因C-Myc抗體IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-C-Mer/MERTK /FITC  熒光素標記c-mer原癌基因*激酶抗體IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-C-Met/HGFR /FITC  熒光素標記肝細胞生長因子受體(原癌基因蛋白)抗體IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-C-Met/HGFR/HRP   辣根過氧化物酶標記肝細胞生長因子受體(原癌基因蛋白)抗體IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2mlMLCK    英文名稱:    肌球蛋白輕鏈激酶抗體    ?0.1ml
MPS1    英文名稱:    單極紡錘體蛋白激酶1抗體    ?0.2ml
Mad2L2    英文名稱:    有絲分裂阻滯缺陷2樣蛋白2抗體    ?0.2ml
Monoamine Oxidase B    英文名稱:    單胺氧化酶B抗體    ?0.1ml
MCM4    英文名稱:    微小染色體維持缺陷蛋白4抗體    ?0.1ml
人胃腺癌細胞;SGC-7901 [SGC7901]使用說明書MAP1LC3A    英文名稱:    自噬微管相關蛋白輕鏈3抗體    ?0.1ml
MRF/C11orf9    英文名稱:    髓鞘基因調控因子抗體    ?0.2ml
MYBPC1    英文名稱:    肌球蛋白結合蛋白C抗體    ?0.2ml
Phospho-MKP1 (Ser318)    英文名稱:    磷酸化絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶1抗體    ?0.1ml

 

 


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