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人胃癌細(xì)胞；MKN-45特性

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產(chǎn)品簡介

人胃癌細(xì)胞；MKN-45特性，質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好，同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明，歡迎前來選購！

詳細(xì)介紹

人胃癌細(xì)胞；MKN-45特性來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。

產(chǎn)品名稱	生長特性	發(fā)貨地	貨期
人胃癌細(xì)胞；MKN-45特性	貼壁生長	上海	3－5天

細(xì)胞名稱
形態(tài)特性   圓形
生長特性貼壁生長
特征特性   該細(xì)胞系由S Akiyama建立，源于一位35歲患有印戒細(xì)胞癌的女性的胃淋巴結(jié)。
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  20%FBS
傳代方法   建議初始濃度2.0×105 cells/ml，1:3傳代；4~5天１次。
傳代情況 C3
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測培養(yǎng)法（-）
STR   Amelogenin：X；CSF1PO：12；D13S317：8，11；D16S539：10；D18S51：16；D19S433：14，16.2；D21S11：31；D2S1338：OL；D3S1358：15，16；D5S818：10，11；D7S820：10，11；D8S1179：13，17；FGA：19，24；TH01：7；TPOX：8；vWA：19；
同工酶
染色體   67~71
使用權(quán)限 A類

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
Anti-CRP/Biotin *化C-反應(yīng)蛋白抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-CRP/FITC 熒光素標(biāo)記C-反應(yīng)蛋白抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-CRP/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記鼠抗人C-反應(yīng)蛋白單克隆抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-CRTAM/FITC 熒光素標(biāo)記CRTAM抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-C-SKI/FITC 熒光素標(biāo)記抗C-SKI抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-CSIG/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞衰老抑制基因抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-CSP/FITC 熒光素標(biāo)記環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-CT/FITC 熒光素標(biāo)記降鈣素抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-CT-1/CTF1/FITC 熒光素標(biāo)記心肌營養(yǎng)素1抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-CT-R/FITC 熒光素標(biāo)記降鈣素受體抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2mlMarek's Disease Vaccine, Live   英文名稱：   雞馬立克氏病火雞皰疹病毒抗體   ?1ml
MDR1   英文名稱：   多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體(C端)   ?0.1ml
Metronidazole   英文名稱：   *抗體   ?0.2ml
MAGE-A4   英文名稱：   黑色素瘤相關(guān)抗原4抗體   ?0.1ml
CAB39   英文名稱：   鈣結(jié)合蛋白39抗體   ?0.1ml
MAVS   英文名稱：   線粒體抗病毒信號(hào)MAVS蛋白抗體   ?0.2ml
MCSF Receptor   英文名稱：   巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體   ?0.1ml
MTA1   英文名稱：   腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白1抗體   ?0.1ml
MUC4   英文名稱：   粘蛋白4抗體   ?0.1ml
Melamine   英文名稱：   三聚氰胺抗體   ?0.2ml
Phospho-mTOR (Ser2481)   英文名稱：   磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗體   ?0.1ml