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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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所 在 地上海市
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更新時(shí)間:2017-01-20 15:00:34瀏覽次數(shù):235次
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人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞;M619復(fù)蘇現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明,歡迎前來(lái)選購(gòu)!
人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞;M619復(fù)蘇來(lái)源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室,可無(wú)菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。
細(xì)胞名稱 人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞;M619復(fù)蘇
形態(tài)特性 多角
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 STR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)三株人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞C918、M619和Mum-2B為同一遺傳背景,懷疑存在交叉污染。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS;20mM Hepes
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,11;D13S317:11;D16S539:8,12;D18S51:15;D19S433:13,14;D21S11:30;D2S1338:24,25;D3S1358:16;D5S818:11,12;D7S820:12;D8S1179:13;FGA:20,21;TH01:8,9.3;TPOX:11;vWA:16,17;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
貼壁生長(zhǎng) | 上海 | 3-5天 |
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
Anti-CULLIN/Cdc53/CUL/SCFCdc4 /FITC 熒光素標(biāo)記CULLIN抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-Cullin 4a/FITC 熒光素標(biāo)記Cullin 4a蛋白抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-COMP/EPD1/FITC 熒光素標(biāo)記軟骨寡聚基質(zhì)蛋白抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-Cx26/FITC 熒光素標(biāo)記整合素樣間隙連接蛋白26抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-CX3CR1/FITC 熒光素標(biāo)記抗CX3C趨化因子受體1抗體 Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-Cx32/FITC 熒光素標(biāo)記間隙連接蛋白32抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-CX36 /FITC 熒光素標(biāo)記間隙連接蛋白36抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-Cx40/FITC 熒光素標(biāo)記間隙連接蛋白40抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-Phospho-Connexin 43 (Ser368) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠等磷酸化Connexin 43蛋白抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-CX45/FITC 熒光素標(biāo)記間隙連接蛋白45抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-CXCL4/PF-4/FITC 熒光素標(biāo)記血小板因子4抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2mlMAGEB2 英文名稱: 黑色素瘤相關(guān)抗原B2抗體 ?0.2ml
MAGEB4 英文名稱: 黑色素瘤相關(guān)抗原B4抗體 ?0.2ml
MGEA5 英文名稱: 組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶抗體(腦膜瘤表達(dá)抗原5) ?0.2ml
phospho-MAP4(Ser1073) 英文名稱: 磷酸化微管相關(guān)蛋白4抗體 ?0.1ml
MAGEB3 英文名稱: 黑色素瘤相關(guān)抗原B3抗體 ?0.2ml
MAZ 英文名稱: 鋅指蛋白801抗體 ?0.1ml
NDUFS2 英文名稱: NDUFS2抗體 ?0.1ml
NDUFAF4 英文名稱: NDUFAF4抗體 ?0.2ml
NDRG1 英文名稱: 分化相關(guān)基因NDRG1抗體 ?0.1ml
?
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