【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人非小細胞肺癌細胞；NCI-H838特性
形態特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞于1984年建系，源于一位59歲患有非小細胞肺癌的白人男性吸煙者，從患者淋巴結轉移灶分離而來。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3~1:6傳代；2~3天換液1次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法（-）
STR
同工酶
染色體 38~53
使用權限 A類
復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
3-苯甲酸甲酯 CAS號： 2557-13-3 進口、國產
4-溴* CAS號： 25574-11-2 現貨供應
3-氟苯硫酚 CAS號： 2557-77-9 說明書
2-氨基-2-乙基丁酸 CAS號： 2566-29-2 報價
聚苯乙烯磺酸鈉 CAS號： 25704-18-1 進口、國產
甲氨基乙腈鹽酸鹽 CAS號： 25808-30-4 現貨供應
4-氨基-2,6-二氯吡啶 CAS號： 2587/2/2 說明書
2-(N-Boc-3-哌啶基)乙胺 CAS號： 259180-77-3 報價
Boc-L-* CAS號： 2592-18-9 進口、國產
(R)-2-氨甲基-1-N-Boc-吡咯烷 CAS號： 259537-92-3 現貨供應
10-氮(雜)蒽 CAS號： 260-94-6 說明書
3-氯-2-氟* CAS號： 2613-22-1 報價人碳酸酐酶(CA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人炭疽（Anthrax）ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人肽-主要組織相容性復合體復合物(pMHC)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人肽聚糖識別蛋白（PGRP-S）ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人肽聚糖(PG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人肽基脯氨酰順反異構酶(PPI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胎球蛋白A（FETU-A）ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胎盤生長因子(PLGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胎盤泌乳素(PL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胎盤堿性磷酸酶(PLAP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胎盤蛋白13（PP13）ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
