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人肺鱗癌細胞;SK-MES-1復蘇

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更新時間:2017-01-20 20:13:44瀏覽次數:254次

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產品簡介

人肺鱗癌細胞;SK-MES-1復蘇現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!

詳細介紹

產品名稱生長特性發貨地貨期
人肺鱗癌細胞;SK-MES-1復蘇貼壁生長上海3-5天

細胞名稱  人肺鱗癌細胞;SK-MES-1復蘇
形態特性   上皮樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   源于一位65歲患有肺鱗狀細胞癌的白人男性,自轉移性胸腔積液分離而來。 
培養條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法   1:3~1:6傳代,4~5天1次,每周換液2~3次。
傳代情況  C5
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養法(-)
STR   Amelogenin:X,Y;CSF1PO:12;D13S317:11;D16S539:13;D18S51:17;D19S433:14;D21S11:29,30;D2S1338:19;D3S1358:16;D5S818:11;D7S820:8;D8S1179:13,14;FGA:20,24;TH01:6,9.3;TPOX:8;vWA:14;
同工酶  
染色體   52~58
使用權限  A類

來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
人水通道蛋白0(AQP-0)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人水痘帶狀皰疹病毒IgM(VZV-IgM)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人水痘帶狀皰疹病毒IgG(VZV-IgG)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人雙氫睪酮(DHT)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人衰變加速因子(DAF/CD55)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人輸血傳播病毒/辛型肝炎病毒((TTV)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人舒*(*)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人瘦素(leptin)ELISA試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人瘦素(LEP)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人受體*激酶(RTKs)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝1-溴-3,4,5-*氧基苯    CAS號:    2675-79-8    說明書
2-氨基-4,5-二甲氧基苯甲酸甲酯    CAS號:    26759-46-6    報價
N,N-二甲基丙烯酰胺    CAS號:    2680/3/7    進口、國產
2-氨基-4-甲基苯甲腈    CAS號:    26830-96-6    現貨供應
N-乙基-2-吡咯烷酮    CAS號:    2687-91-4    說明書
3-羧基苯硼酸頻那醇酯    CAS號:    269409-73-6    報價
4-吡唑硼酸頻哪醇酯    CAS號:    269410-08-4    進口、國產
4-吡唑硼酸頻哪醇酯    CAS號:    269410-08-4     現貨供應
8-溴-1-辛烯    CAS號:    2695-48-9    說明書
beta-*芐酯對甲苯磺酸鹽    CAS號:    27019-47-2    報價
2-溴-5-甲氧基甲苯    CAS號:    27060-75-9    進口、國產
2-(2-氨乙基)吡啶    CAS號:    2706-56-1    現貨供應

 

 


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