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上海撫生實業有限公司
人卵巢癌細胞CoC1*耐藥亞株;CoC1/DDP培養細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人卵巢癌細胞CoC1*耐藥亞株;CoC1/DDP培養
形態特性 圓形或橢圓形
生長特性 懸浮生長
特征特性 應用*連續作用并逐步提高藥量的遞增壓力選擇法,從人卵巢腺癌細胞COC1 中分離出對*耐藥的細胞亞株(COC1/DDP)
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 每3天傳代一次
傳代情況 不詳
凍存條件 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:11;D13S317:11,12;D16S539:10,12,13;D18S51:12,18;D19S433:14,15;D21S11:30,33.2;D2S1338:24;D3S1358:15,20;D5S818:12,13;D7S820:9,13,14;D8S1179:12,13;FGA:23,24;TH01:6,7;TPOX:8;vWA:16,17,20;
同工酶
染色體
使用權限 A類
產品名稱 | 人卵巢癌細胞CoC1*耐藥亞株;CoC1/DDP培養 |
貨期 | 3-5天 |
發貨地 | 上海 |
復蘇操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
4-BROMO-2-METHOXYBENZALDEHYDE CAS號: 43192-33-2 現貨供應
N-氨基嗎啉 CAS號: 4319-49-7 說明書
溴代環丙烷 CAS號: 4333-56-6 報價
4-乙氧羰基苯硼酸 CAS號: 4334-88-7 進口、國產
3-氟-5-溴* CAS號: 433939-27-6 現貨供應
2-丁炔酸乙酯 CAS號: 4341-76-8 說明書
5-羥基* CAS號: 4350/9/8 報價
4-喹啉甲醛 CAS號: 4363-93-3 進口、國產
2-氯甲基吡啶 CAS號: 4377-33-7 現貨供應
2,6-二氟苯甲醚 CAS號: 437-82-1 說明書
4-(4-氨基苯基)*啉-3-酮 CAS號: 438056-69-0 報價
(R)-1-N-BOC-3-甲酸甲酯 CAS號: 438631-77-7 進口、國產軍團菌抗體IgA(LP Ab-IgA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人巨噬細胞集落刺激因子受體(M-CSFR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人巨噬細胞活化因子(MAF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人巨噬細胞刺激蛋白(MSP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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