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人卵巢癌細胞CoC1*耐藥亞株;CoC1/DDP培養

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更新時間:2017-01-20 22:43:19瀏覽次數:213次

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產品簡介

人卵巢癌細胞CoC1*耐藥亞株;CoC1/DDP培養細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。

詳細介紹

【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療

細胞名稱  人卵巢癌細胞CoC1*耐藥亞株;CoC1/DDP培養
形態特性   圓形或橢圓形
生長特性  懸浮生長
特征特性   應用*連續作用并逐步提高藥量的遞增壓力選擇法,從人卵巢腺癌細胞COC1 中分離出對*耐藥的細胞亞株(COC1/DDP) 
培養條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   每3天傳代一次
傳代情況  不詳
凍存條件   基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養法(-)
STR   Amelogenin:X;CSF1PO:11;D13S317:11,12;D16S539:10,12,13;D18S51:12,18;D19S433:14,15;D21S11:30,33.2;D2S1338:24;D3S1358:15,20;D5S818:12,13;D7S820:9,13,14;D8S1179:12,13;FGA:23,24;TH01:6,7;TPOX:8;vWA:16,17,20;
同工酶  
染色體  
使用權限  A類

產品名稱人卵巢癌細胞CoC1*耐藥亞株;CoC1/DDP培養
貨期3-5天
發貨地上海

復蘇操作要點: 
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
4-BROMO-2-METHOXYBENZALDEHYDE    CAS號:    43192-33-2    現貨供應
N-氨基嗎啉    CAS號:    4319-49-7    說明書
溴代環丙烷    CAS號:    4333-56-6    報價
4-乙氧羰基苯硼酸    CAS號:    4334-88-7    進口、國產
3-氟-5-溴*    CAS號:    433939-27-6    現貨供應
2-丁炔酸乙酯    CAS號:    4341-76-8    說明書
5-羥基*    CAS號:    4350/9/8    報價
4-喹啉甲醛    CAS號:    4363-93-3    進口、國產
2-氯甲基吡啶    CAS號:    4377-33-7    現貨供應
2,6-二氟苯甲醚    CAS號:    437-82-1    說明書
4-(4-氨基苯基)*啉-3-酮    CAS號:    438056-69-0    報價
(R)-1-N-BOC-3-甲酸甲酯    CAS號:    438631-77-7    進口、國產軍團菌抗體IgA(LP Ab-IgA)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人巨噬細胞集落刺激因子受體(M-CSFR)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人巨噬細胞活化因子(MAF)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人巨噬細胞刺激蛋白(MSP)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人*酶(Arg)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人*加壓素(AVP)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝

 

 

 


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