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綠色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸癌細(xì)胞；HCT116-GFP復(fù)蘇

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產(chǎn)品簡介

綠色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸癌細(xì)胞；HCT116-GFP復(fù)蘇現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好，同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明，歡迎前來選購！

詳細(xì)介紹

綠色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸癌細(xì)胞；HCT116-GFP復(fù)蘇來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。

細(xì)胞名稱 綠色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸癌細(xì)胞；HCT116-GFP復(fù)蘇
形態(tài)特性   上皮樣；多角形
生長特性貼壁生長
特征特性   GFP穩(wěn)定表達(dá)
培養(yǎng)條件   IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium  10%FBS；200ug/ml G418
傳代方法   1:3傳代；3~4天1次。
傳代情況
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR   Amelogenin：X，Y；CSF1PO：7，10；D13S317：10，12；D16S539：11，13；D18S51：16，17；D19S433：12，13；D21S11：29，30；D2S1338：16；D3S1358：12，18，19；D5S818：10，11；D7S820：11，12；D8S1179：12，14；FGA：18，23；TH01：8，9；TPOX：8；vWA：17，22；
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類

產(chǎn)品名稱	生長特性	發(fā)貨地	貨期
	貼壁生長	上海	3－5天

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
人基質(zhì)γ羧基*蛋白(MGP)ELISA 試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
人基膜聚糖(lumican)ELISA 試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
人肌抑素（MSTN）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
人肌養(yǎng)蛋白(dystrophin)ELISA 試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
人肌細(xì)胞生成素(MYOG)ELISA 試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA 試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
人肌酸激酶(CK)ELISA 試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
人肌球蛋白重鏈(MHC)ELISA 試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
人肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)ELISA 試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
人肌球蛋白輕鏈(MLC)ELISA 試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
人肌球蛋白(Myosin)ELISA 試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
人肌腱蛋白R(shí)(TN-R)ELISA 試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝11,3-二甲基-4-哌啶酮   CAS號(hào)：   4629-80-5   說明書
亞硝酸正戊酯   CAS號(hào)：   463-04-7   報(bào)價(jià)
亞麻酸   CAS號(hào)：   463-40-1   進(jìn)口、國產(chǎn)
對(duì)氯苯乙酰腈   CAS號(hào)：   4640-66-8   現(xiàn)貨供應(yīng)
3-乙氧甲酰-4-哌酮鹽酸鹽   CAS號(hào)：   4644-61-5   說明書
5-羧基噻吩-2-硼酸   CAS號(hào)：   465515-31-5   報(bào)價(jià)
5-溴-1-甲基-1H-吲唑   CAS號(hào)：   465529-57-1   進(jìn)口、國產(chǎn)
2,6-二羥基-4-甲基吡啶   CAS號(hào)：   4664-16-8   現(xiàn)貨供應(yīng)
4-溴-2-氯三氟甲苯   CAS號(hào)：   467435-07-0   說明書
5-溴靛紅酸酐   CAS號(hào)：   4692-98-2   報(bào)價(jià)
5-溴噻吩-2-甲醛   CAS號(hào)：   4701-17-1   進(jìn)口、國產(chǎn)