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上海撫生實業有限公司
人慢性髓系白血病細胞(白介素15基因修飾);K562/IL15使用說明書細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。
產品名稱 | 人慢性髓系白血病細胞(白介素15基因修飾);K562/IL15使用說明書 |
貨期 | 3-5天 |
發貨地 | 上海 |
細胞名稱 人慢性髓系白血病細胞(白介素15基因修飾);K562/IL15使用說明書
形態特性 圓形;淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 IL-15穩定表達
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 維持細胞濃度在1×105~1×106/ml,每2~3天換液1次。
傳代情況
凍存條件 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:X; CSF1PO:10; D12S391:23; D13S317:8; D16S539:11,12; D18S51:15,16; D19S433:14,14.2; D21S11:29,30; D2S1338:16,17; D3S1358:16; D5S818:12; D6S1043:11,15; D7S820:9,11; D8S1179:12; FGA:21,24; Penta E:5,14; TH01:9.3; TPOX:8,9; vWA:16;
同工酶
染色體
使用權限 A類
復蘇操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
鄰苯二甲酰* CAS號: 4702-13-0 現貨供應
N-甲基-4-氰基苯胺 CAS號: 4714-62-9 說明書
4-氯吡啶-2,6-二羧酸 CAS號: 4722-94-5 報價
2,9-二甲基-4,7-聯苯-1,10-鄰二氮雜菲 CAS號: 4733-39-5 進口、國產
3,6-二羥基鄰苯二甲腈 CAS號: 4733-50-0 現貨供應
2-溴丁酸乙酯 CAS號: 533-68-6 說明書
(S)-1-溴-2-甲基丁烷 CAS號: 534-00-9 報價
1,2-戊二醇 CAS號: 5343-92-0 進口、國產
4-溴-3-硝基苯甲醚 CAS號: 5344-78-5 現貨供應
3-氯-4-甲氧基苯胺 CAS號: 5345-54-0 說明書肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人肌酐(Cr)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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人活化素A(Activin-A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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