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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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所 在 地上海
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更新時間:2017-01-21 08:40:32瀏覽次數(shù):233次
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紅色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 320DM-RFP特性,質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
紅色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 320DM-RFP特性 | 貼壁生長 | 上海 | 3-5天 |
細(xì)胞名稱 紅色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 320DM-RFP特性
形態(tài)特性 上皮樣;多角形
生長特性 貼壁生長
特征特性 RFP穩(wěn)定表達(dá)
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:5~1:10傳代;2~3天換液1次。
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
PIRT 英文名稱: 磷酸肌醇相互作用蛋白抗體 ?0.2ml
Nucleoside phosphorylase 英文名稱: 嘌呤核苷磷酸化酶抗體 ?0.1ml
phospho-PKC Epsilon(Ser729) 英文名稱: 磷酸化蛋白激酶C/p-PKC ε抗體 ?0.1ml
Paralemmin 1 英文名稱: 細(xì)胞膜調(diào)控蛋白Paralemmin 1抗體 ?0.2ml
PHD2 英文名稱: *羥化酶2抗體 ?0.1ml
PSAP 英文名稱: 鞘脂激活蛋白原抗體 ?0.1ml
PBR 英文名稱: 外周苯二氮受體抗體 ?0.1ml
APRIN 英文名稱: 雄激素誘導(dǎo)增殖抑制蛋白抗體 ?0.2ml
Phosphoserine 英文名稱: 磷酸化*抗體 ?0.1ml
PCNT 英文名稱: 中心粒周蛋白抗體 ?0.2ml
PCNA(1C11) 英文名稱: 小鼠增殖細(xì)胞核抗原單克隆抗體 ?0.1ml
phospho-p107(Thr369) 英文名稱: 磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤樣蛋白p107抗體 ?0.1mlAnti-MYOG/Myogenin/FITC 熒光素標(biāo)記肌紅蛋白抗體(肌細(xì)胞生成素)IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-RIP3/FITC 熒光素標(biāo)記受體結(jié)合**激酶3抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-MYOZ/MYOZ1 /FITC 熒光素標(biāo)記MYOZ抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-MYSM1/FITC 熒光素標(biāo)記MYSM1抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-CHRNA4/FITC 熒光素標(biāo)記煙堿型乙酰*受體α4抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-CHRNA7/FITC 熒光素標(biāo)記煙堿型乙酰*受體α7抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-NADPH/FITC 熒光素標(biāo)記抗NADPH氧化酶抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-Nanog/FITC 熒光素標(biāo)記胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-NAIF1 protein/FITC 熒光素標(biāo)記核凋亡誘導(dǎo)因子蛋白1抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-NAP1 /FITC 熒光素標(biāo)記核小體組裝蛋白1抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-PNAT/NAT2/FITC 熒光素標(biāo)記N-乙酰基轉(zhuǎn)移酶2抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-Natrexone/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗納曲酮抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
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