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人非小細胞肺癌細胞;NCI-H358復蘇

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更新時間:2017-01-21 08:52:25瀏覽次數:137次

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產品簡介

人非小細胞肺癌細胞;NCI-H358復蘇現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!

詳細介紹

人非小細胞肺癌細胞;NCI-H358復蘇來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。

細胞名稱  人非小細胞肺癌細胞;NCI-H358復蘇
形態特性   上皮樣;多角形
生長特性  貼壁生長
特征特性   1981年從一位開始*之前的患者的腫瘤組織中分離建株。 超微結構研究表明細胞質中有Clara細胞的特征結構 細胞表達主要的肺表面結合蛋白SP-A的蛋白和RNA。 不表達SP-B和SP-C。 他們在軟瓊脂中的克隆形成效率為0.83%。  
培養條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   1:2傳代;3天傳代一次。
傳代情況  
凍存條件   基礎培養基+8%DMSO+22%FBS
支原體檢測  培養法(-)
STR   Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,12;D13S317:8,12;D16S539:12,13;D18S51:14;D19S433:13,14;D21S11:28,30;D2S1338:17,23;D3S1358:14,18;D5S818:10,12;D7S820:10,11;D8S1179:13,14;FGA:20,21;TH01:6;TPOX:8,9;vWA:17
同工酶  
染色體  
使用權限  A類

產品名稱生長特性發貨地貨期
貼壁生長上海3-5天

細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
Porimin    英文名稱:    前細胞脹亡受體誘導膜損傷蛋白抗體    ?0.2ml
PARP3    英文名稱:    多腺苷二磷酸多聚酶3抗體/多聚ADP-核糖聚合酶3    ?0.2ml
PARP4    英文名稱:    多腺苷二磷酸多聚酶4抗體/多聚ADP-核糖聚合酶4    ?0.2ml
PABPC4L    英文名稱:    聚腺苷酸養結合蛋白4抗體    ?0.1ml
PTP4A2    英文名稱:    肝再生磷酸酯酶2抗體    ?0.2ml
Protein Z    英文名稱:    蛋白Z抗體    ?0.2ml
Protein S    英文名稱:    蛋白S抗體    ?0.2ml
PEBP2B    英文名稱:    多瘤病毒增強了結合蛋白2β抗體    ?0.1ml
PDE4D    英文名稱:    磷酸二酯酶4D抗體    ?0.1ml
Profilin 2    英文名稱:    前纖維蛋白2抗體    ?0.1ml
PRCP    英文名稱:    脯氨酰羧肽酶抗體    ?0.1ml
P2Y4    英文名稱:    P2Y4受體抗體    ?0.1mlAnti-NUMB/FITC  熒光素標記膜相關蛋白Numb抗體IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-Phospho-Numb (Ser276)/FITC  熒光素標記磷酸化膜相關蛋白Numb抗體IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-NOS-3/eNOS /FITC  熒光素標記一氧化氮合成酶-3抗體(內皮型)IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-Phospho-eNOS (Thr495)/FITC  熒光素標記磷酸化一氧化氮合成酶3抗體(內皮型)IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-Phospho-eNOS (Ser1177) /FITC  熒光素標記磷酸化一氧化氮合成酶3抗體(內皮型)IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-Phospho-eNOS (Ser113)/FITC   熒光素標記磷酸化一氧化氮合成酶3抗體(內皮型)IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-Notch1/MOTC /FITC  熒光素標記跨膜受體蛋白Notch-1抗體IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-Notch3/FITC   熒光素標記跨膜受體蛋白Notch-3抗體IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-Nox-4/NADH /FITC  熒光素標記NADPH氧化酶4抗體IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-NPPC/FITC  熒光素標記促尿鈉排泄肽前體C抗體IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml

 

 


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