| 產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
| 人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞；KU812特性 | 懸浮生長 | 上海 | 3－5天 |
細(xì)胞名稱 人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞；KU812特性
形態(tài)特性 圓形
生長特性 懸浮生長
特征特性
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR Amelogenin：X,Y；CSF1PO：12,13；D12S391：17,17；D13S317：8,8；D16S539：9,9；D18S51：13,13；D19S433：13,14；D21S11：30,31.2；D2S1338：18,18；D3S1358：15,15；D5S818：10,10；D6S1043：11,11；D7S820：12,12；D8S1179：11,15；FGA：22,24；Penta E：5,19；TH01：9,9；TPOX：12,12；vWA：15,15；
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
人操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
Anti-RACK1/FITC 熒光素標(biāo)記受體激活蛋白激酶C1抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格： 0.2ml
Anti-PAX3/FITC 熒光素標(biāo)記配對盒基因3抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格： 0.2ml
AAnti-PCNA/FITC 熒光素標(biāo)記增殖細(xì)胞核抗原抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格： 0.2ml
Anti-PCX/FITC 熒光素標(biāo)記足細(xì)胞特異蛋白抗體 Multi-class antibodies 規(guī)格： 0.2ml
Anti-PD-1/FITC 熒光素標(biāo)記程序死亡1抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格： 0.2ml
ANti-PDCD4/FITC 熒光素標(biāo)記凋亡相關(guān)蛋白4抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格： 0.2ml
Anti-TFAR19/PDCD5 /FITC 熒光素標(biāo)記凋亡相關(guān)蛋白TFAR19抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格： 0.2ml
Anti-PDE4D/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸二酯酶4D抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格： 0.2mlphospho-PDHA1(Ser293) 英文名稱： 磷酸化丙酮酸脫氫酶α1抗體 ?0.1ml
PDPK1 英文名稱： 3磷酸肌醇依賴蛋白激酶1抗體 ?0.2ml
Phospho-PDPK1(Tyr373 + Tyr376) 英文名稱： 磷酸化3磷酸肌醇依賴蛋白激酶1抗體 ?0.1ml
p53BP1 英文名稱： p53結(jié)合蛋白1抗體 ?0.2ml
phospho-PKC delta (Tyr52) 英文名稱： 磷酸化蛋白激酶C亞D型抗體 ?0.1ml
phospho-PKC delta (Thr505/507) 英文名稱： 磷酸化蛋白激酶C亞D型抗體 ?0.1ml
PKC zeta 英文名稱： 蛋白激酶C zeta 抗體 ?0.1ml
PRG2 英文名稱： 嗜酸粒細(xì)胞顆粒關(guān)鍵堿蛋白抗體 ?0.2ml
Proinsulin 英文名稱： 胰島素原抗體 ?0.1ml
PCSK4 英文名稱： 原蛋白轉(zhuǎn)化酶4抗體 ?0.1ml
PMCA1 英文名稱： 細(xì)胞膜鈣ATP酶1抗體 ?0.2ml
PCK1 英文名稱： 磷酸烯醇丙酮酸羧激酶抗體 ?0.2ml
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