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人舌鱗癌細胞;SCC15培養

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所  在  地上海市

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更新時間:2017-01-21 09:14:04瀏覽次數:331次

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產品簡介

人舌鱗癌細胞;SCC15培養細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。

詳細介紹

產品名稱人舌鱗癌細胞;SCC15培養
貨期3-5天
發貨地上海

細胞名稱  人舌鱗癌細胞;SCC15培養
形態特性   上皮樣
生長特性  貼壁生長
特征特性    
培養條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  
傳代情況  
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養法(-)
STR   Amelogenin:X,X;CSF1PO:10,11;D12S391:20,21;D13S317:10,12;D16S539:9,10;D18S51:13,16;D19S433:13,13;D21S11:27,30;D2S1338:17,23;D3S1358:15,18;D5S818:11,12;D6S1043:14,18;D7S820:10,12;D8S1179:12,17;FGA:18,21;Penta E:17,17;TH01:9,9;TPOX:8,12;vWA:14,16;
同工酶  
染色體  
使用權限  A類

復蘇操作要點: 
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
TIG2    英文名稱:    *受體應答蛋白2抗體    ?0.1ml
RAP1A    英文名稱:    抗Rap1A抗體    ?0.1ml
RAB7    英文名稱:    RAS癌基因相關蛋白RAB7抗體    ?0.1ml
RCL    英文名稱:    c-Myc應答蛋白抗體    ?0.2ml
RAB6B    英文名稱:    RAS癌基因相關蛋白RAB6B抗體    ?0.1ml
RABGAP1    英文名稱:    Rab蛋白GTP酶激活蛋白1抗體    ?0.2ml
RELM beta    英文名稱:    結腸癌相關基因蛋白抗體(resistin-like β)    ?0.1ml
phospho-Ron(Tyr1238)    英文名稱:    磷酸化原癌基因c-Met相關*激酶抗體    ?0.1ml
RNF6    英文名稱:    環指蛋白6抗體    ?0.2ml
Ribonuclease 6    英文名稱:    核糖核酸酶6抗體    ?0.2ml
Phospho-RASGRF1 (Ser929)    英文名稱:    磷酸化Ras特異*核苷酸釋放因子1    ?0.1mlAnti-Phospho-FAK (Tyr861) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化粘著斑激酶抗體IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-Phospho-FAK (Tyr576/577) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化粘著斑激酶抗體IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-Phospho-FAK (Tyr925) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化粘著斑激酶抗體IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-Phospho-FAK (Tyr407) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化粘著斑激酶抗體IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-ER- Alpha(phospho-Tyr537)/FITC  熒光素標記抗大、小鼠磷酸化雌激素受體α抗體IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-Phospho-Progesterone Receptor (Ser190)/FITC  熒光素標記磷酸化孕激素受體抗體IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-phospho-ERK1(pThr202/pTyr204)/FITC  熒光素標記抗磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-phospho-ERK1(pThr202/pThr204)+phospho ERK2(pThr183/pTyr185)/FITC  熒光素標記抗人、大、小鼠磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-phospho-ERK1(Thr197/Thr202) /FITC  熒光素標記磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-phospho-CaMK2a (pThr286)/FITC  熒光素標記抗磷酸化鈣/鈣調素依賴蛋白激酶2α抗體IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-phospho-CaMK2a(pTyr231) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠等磷酸化鈣/鈣調素依賴蛋白激酶2α抗體IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-phospho-ATF2(pSer490/pSer498)/FITC  熒光素標記抗磷酸化活化復制因子2抗體IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-phospho APP(pThr668)/FITC  熒光素標記抗磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml
Anti-phospho-P53(pSer392)/FITC  熒光素標記抗磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體IgG    Multi-class antibodies    規格:     0.2ml

 

 


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