Cas9穩(wěn)定表達的人胰腺癌細胞；PANC-1-Cas9-558復蘇來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務。
| 產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
| Cas9穩(wěn)定表達的人胰腺癌細胞；PANC-1-Cas9-558復蘇 | 貼壁生長 | 上海 | 3－5天 |
細胞名稱
形態(tài)特性 上皮樣；多角形
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使PANC-1細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo，經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS；400ug/ml G418
傳代方法 1:2~1:4傳代；每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,12；D12S391：22,22；D13S317：11,11；D16S539：11,11；D18S51：12,12；D19S433：11,16；D21S11：28,28；D2S1338：23,24；D3S1358：17,17；D5S818：11,13；D6S1043：11,12；D7S820：8,10；D8S1179：14,15；FGA：21,21；；Penta E：7,14；TH01：7,8；TPOX：8,11；vWA：15,15；
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
phospho-RUNX1(Ser303) 英文名稱： 磷酸化急髓細胞白血病1蛋白抗體 ?0.2ml
RUBISCO 英文名稱： 核酮糖1,5二磷酸羧化酶抗體 ?0.1ml
RUNX1 英文名稱： 急髓細胞白血病1蛋白抗體 ?0.1ml
RET 英文名稱： 指狀蛋白RET抗體 ?0.2ml
RNF39 英文名稱： 環(huán)指蛋白39抗體 ?0.2ml
RAB40B 英文名稱： RAS癌基因家族蛋白RAB40B抗體 ?0.2ml
phospho-RKIP (Ser153) 英文名稱： 磷酸化Raf激酶抑制蛋白抗體 ?0.1ml
RERE 英文名稱： 肌相關(guān)蛋白1抗體 ?0.2ml
RAB40A 英文名稱： RAS癌基因家族蛋白RAB40A抗體 ?0.2ml
RAB40C 英文名稱： RAS癌基因家族蛋白RAB40C抗體 ?0.2ml
Relaxin 3 英文名稱： 松弛素3抗體 ?0.2ml
Rheumatoid Factor 英文名稱： 類風濕因子抗體 ?0.2mlAnti-PLAUR/uPAR/FITC 熒光素標記*型纖溶酶原激活因子受體抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格： 0.2ml
Anti-Plexin A1/Plexin 1/FITC 熒光素標記神經(jīng)叢蛋白A1抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格： 0.2ml
Anti-Plexin A2/FITC 熒光素標記神經(jīng)叢蛋白A2抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格： 0.2ml
Anti-Plexin B1/Semaphorin receptor/FITC 熒光素標記神經(jīng)叢蛋白B1抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格： 0.2ml
Anti-PLASTIN3/T Plastin/FITC 熒光素標記絲束蛋白T Plastin抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格： 0.2ml
Anti-PLG/FITC 熒光素標記纖維蛋白溶酶原抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格： 0.2ml
Anti-PLGF/FITC 熒光素標記胎盤生長因子抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格： 0.2ml
Anti-PLGF /FITC 熒光素標記人胎盤生長因子（抗體）IgG Multi-class antibodies 規(guī)格： 0.2ml
Anti-PLGF/FITC 熒光素標記小鼠胎盤生長因子抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格： 0.2ml
Anti-PMP2 /FITC 熒光素標記周圍神經(jīng)髓鞘蛋白2抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格： 0.2ml
Anti-PMP-22/FITC 熒光素標記外周髓鞘蛋白-22IgG Multi-class antibodies 規(guī)格： 0.2ml
Anti-PMSA/FOLH1/FITC 熒光素標記前列腺特異膜抗原抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格： 0.2ml
