| 產品名稱 | 生長特性 | 發貨地 | 貨期 |
| Cas9穩定表達的人食管癌細胞；EC109-Cas9-570復蘇 | 貼壁生長 | 上海 | 3－5天 |
細胞名稱 Cas9穩定表達的人食管癌細胞；EC109-Cas9-570復蘇
形態特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使EC109細胞穩定表達Cas9-Flag-Neo，經400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白，可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS；400ug/ml G418
傳代方法 1:3傳代；2~3天1次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法（-）
STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,10；D12S391：19,20；D13S317：11,11；D16S539：12,12；D18S51：12,16；D19S433：13,13；D21S11：30,30；D2S1338：17,20；D3S1358：17,17；D5S818：12,12；D6S1043：13,13；D7S820：8,12；D8S1179：13,14；；FGA：25,25；Penta E：16,16；TH01：9,9；TPOX：8,8；vWA：16,17；
同工酶
染色體
使用權限 A類
來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室，可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量*，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。
Anti-PS-1(CT)/FITC 熒光素標記早老素蛋白-1抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-Melamine/HRP 辣根過氧化物酶標記三聚氰胺單克隆抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-PSAP/PAP/FITC 熒光素標記前列腺酸磷酸酶抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-prox-1 /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠prox-1蛋白抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-PSCA /FITC 熒光素標記抗前列腺干細胞抗原抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-PSD93/FITC 熒光素標記突觸后密度蛋白93抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-Phospho-PSD93 (Tyr340) /FITC 熒光素標記磷酸化突觸后密度蛋白93抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-PSD-95/FITC 熒光素標記突觸后密度蛋白95抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-P-selectin/CD62p /FITC 熒光素標記P選擇素抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-Phospho-PSD95 (Tyr236/Tyr240) /FITC 熒光素標記磷酸化突觸后密度蛋白95抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-PSMD9/Bridge-1 /FITC 熒光素標記蛋白酶調解因子9抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2mletinol binding protein 英文名稱： *結合蛋白抗體 ?0.1ml
RGC32 英文名稱： 補體應答基因32抗體 ?0.1ml
RSBN1L 英文名稱： 細胞堿蛋白1樣蛋白抗體 ?0.1ml
RNF144 英文名稱： E3泛素蛋白連接酶144A抗體 ?0.2ml
RFX4 英文名稱： 轉錄調控因子RFX4抗體 ?0.2ml
RILPL2 英文名稱： Rab溶酶體相互作用蛋白樣2抗體 ?0.2ml
RITA 英文名稱： 12號染色體開放閱讀框52抗體 ?0.2ml
RPGRIP1L 英文名稱： 梅克爾憩室綜合征相關蛋白5抗體 ?0.2ml
Radical Fringe 英文名稱： β1,3-N-乙酰糖基轉移酶抗體 ?0.2ml
RAB3GAP1 英文名稱： RAB3-GTP酶激活蛋白催化亞單位1抗體 ?0.2ml
