細胞名稱 Cas9穩定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-590使用說明書
形態特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使HEC-1B細胞穩定表達Cas9-Flag-Puromycin，經2ug/ml嘌呤霉素篩選得到的單克隆，經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白，可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS；2ug/ml Puromycin
傳代方法 消化3-5分鐘；1:2傳代；3天內可長滿。
傳代情況 C3
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,12；D12S391：18,19；D13S317：11,11；D16S539：11,12；D18S51：16,20；D19S433：13,13；D21S11：30,31；D2S1338：18,19；D3S1358：15,15；D5S818：11,13；D6S1043：12,18；D7S820：9,11；D8S1179：13,14；FGA：21,21；Penta E：11,11；TH01：6,7；TPOX：8,11；vWA：18,18；
同工酶
染色體
使用權限 A類
復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
Anti-TEM 1/CD248/FITC 熒光素標記內涎蛋白/內皮唾液酸蛋白抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-TEM8/FITC 熒光素標記腫瘤血管內皮標志物8抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-rInsulin /HRP 辣根過氧化物酶標記抗*抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-rInsulin /FITC 熒光素標記抗*抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-rInsulin human monoclonal/FITC 熒光素標記小鼠*單克隆抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-rInsulin monoclonal (pig)/FITC 熒光素標記小鼠抗胰島素單克隆抗體（豬）IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-TIMP-1/FITC 熒光素標記金屬蛋白酶組織抑制因子-1抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-TIMP-2/FITC 熒光素標記金屬蛋白酶組織抑制因子-2抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
AAnti-TLR4/FITC 熒光素標記Toll樣受體4抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-TLR5/CD285 /FITC 熒光素標記Toll樣受體5抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-TLR6/CD286/FITC 熒光素標記Toll樣受體6抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2ml
Anti-TLR9/CD289/FITC 熒光素標記Toll樣受體9抗體IgG Multi-class antibodies 規格： 0.2mlSH3GL3 英文名稱： 胞漿蛋白SH3GL3抗體 ?0.2ml
ABCG8 英文名稱： 三磷酸腺苷結合轉運蛋白G超家族成員8抗體 ?0.2ml
SLITRK2 英文名稱： 神經突觸相關蛋白SLITRK2抗體 ?0.2ml
SLITRK3 英文名稱： 神經突觸相關蛋白SLITRK3抗體 ?0.1ml
SLITRK4 英文名稱： 神經突觸相關蛋白SLITRK4抗體 ?0.2ml
SLITRK5 英文名稱： 神經突觸相關蛋白SLITRK5抗體 ?0.2ml
SLITRK6 英文名稱： 神經突觸相關蛋白SLITRK6抗體 ?0.2ml
SNAIL + SLUG 英文名稱： 鋅指轉錄因子Slug+SNAIL抗體 ?0.1ml
phospho-SNAIL + SLUG (Ser246) 英文名稱： 磷酸化鋅指轉錄因子Slug+SNAIL抗體 ?0.1ml
SORCS2 英文名稱： 液泡蛋白分選受體SORCS2抗體 ?0.2ml
SOX21 英文名稱： 轉錄因子21抗體 ?0.2ml
