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人外周血慢性髓性白血病細(xì)胞;KU812E特性

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品       牌

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所  在  地上海

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更新時間:2017-01-21 11:10:55瀏覽次數(shù):182次

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產(chǎn)品簡介

人外周血慢性髓性白血病細(xì)胞;KU812E特性,質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品名稱生長特性發(fā)貨地貨期
人外周血慢性髓性白血病細(xì)胞;KU812E特性懸浮上海3-5天

細(xì)胞名稱  人外周血慢性髓性白血病細(xì)胞;KU812E特性
形態(tài)特性   髓樣
生長特性  懸浮
特征特性   該細(xì)胞核型為58,X,Y;可產(chǎn)生TGF-β。 
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  20%FBS
傳代方法   1.0~2.0E+05 clles/ml
傳代情況  
凍存條件   90%FBS+10%DMSO
支原體檢測  培養(yǎng)法(-)指示細(xì)胞法(-)
STR   Amelogenin:X,Y;CSF1PO:12,13;D13S317:8;D16S539:9;D18S51:13;D21S11:30,31.2;D3S1358:15;D5S818:10;D7S820:12;D8S1179:11,15;FGA:22,24;PentaD:12;PentaE:5,19;TH01:9;TPOX:12;VWA:15
同工酶  
染色體  
使用權(quán)限  A類

來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
*,四水    CREATINE PHOSPHATE    922-32-7    25G    高純級
*,四水    CREATINE PHOSPHATE, DISODIUM SALT, TETRAHYDRATE            高純級
*    POTASSIUM PERMANGANATE    7722-64-7    2.5KG    ACS級
*    POTASSIUM PERMANGANATE    7722-64-7    500G    ACS級
羅丹名B    RHODAMINE B    81-88-9    100G    試劑級
羅丹名B    RHODAMINE B    81-88-9    500G    試劑級
*,二水    CALCIUM PHOSPHATE DIBASIC DIHYDRATE    7789-77-7    2.5KG    高純級
*,二水    CALCIUM PHOSPHATE DIBASIC DIHYDRATE    7789-77-7    500G    高純級
二硫蘇糖醇    DL-DITHIOTHREITOL (DTT)            生物技術(shù)級
二硫蘇糖醇    DL-DITHIOTHREITOL (DTT)            生物技術(shù)級
二硫蘇糖醇    DL-DITHIOTHREITOL (DTT)            生物技術(shù)級
二硫蘇糖醇    DL-DITHIOTHREITOL (DTT)            生物技術(shù)級Phospho-Tyrosine Hydroxylase (Ser40)    英文名稱:    磷酸化*羥化酶抗體    ?0.1ml
Topoisomerase I    英文名稱:    拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗體    ?0.1ml
TIN-Ag    英文名稱:    腎小管間質(zhì)腎炎抗原抗體    ?0.2ml
TMEM176A    英文名稱:    跨膜蛋白176A抗體    ?0.1ml
TMEM176A    英文名稱:    跨膜蛋白176A抗體    ?0.1ml
TBX3    英文名稱:    轉(zhuǎn)錄因子Tbx3抗體    ?0.2ml
tinagl1    英文名稱:    tinagl1抗體    ?0.2ml
TRPV5    英文名稱:    辣椒素受體5抗體    ?0.1ml
TRA1 variant    英文名稱:    腫瘤排斥抗原gp96 1 變異體抗體    ?0.1ml
TFPI/LACI    英文名稱:    組織因子途徑抑制劑抗體    ?0.1ml
TRIM47    英文名稱:    星形細(xì)胞瘤高表達(dá)蛋白抗體(環(huán)指蛋白100)    ?0.2ml

 

 


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