人膽管細胞型肝癌細胞；HCCC-9810特性來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室，可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
細胞名稱 人膽管細胞型肝癌細胞；HCCC-9810特性
形態特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 HCCC-9810細胞株源自一位女性肝膽管細胞癌患者。 HCCC-9810細胞呈上皮細胞樣，染色體模式數為71，但染色體數目可以在22-117的范圍內變動。倍增時間為20.4小時。 AFP，CEA和CA19-9的分泌水平低，在裸鼠中的成瘤率為20%。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清，10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X；CSF1PO:11,12；D13S317:11；D16S539:9,12；D18S51:15；D19S433:13,14；D21S11:30,32；D2S1338:17,19；D3S1358:17；D5S818:11；D7S820:10,12；D8S1179:10,13；FGA:23,24；TH01:9；TPOX:8,11；vWA:16,17
同工酶
染色體
細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量*，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。
TG緩沖液,10X TRIS/GLYCINE BUFFER 1L 超純級
TG緩沖液,10X TG 10X LIQUID CONCENTRATE 4L 超純級
TG緩沖液,10X TG, 10X LIQUID CONCENTRATE 5L 超純級
丫啶黃素 ACRIFLAVINE, NEUTRAL 8048-52-0 100G 超純級
丫啶黃素 ACRIFLAVINE, NEUTRAL 8048-52-0 250G 超純級
丙烯酰胺/甲叉 29:1, 40%溶液 ACRYL/BIS 29:1 1L 超純級
丙烯酰胺/甲叉 29:1, 40%溶液 ACRYL/BIS 29:1 500ML 超純級
溴酚藍,鈉鹽 BROMOPHENOL BLUE SODIUM SALT 62625-28-9 100G ACS級
溴酚藍,鈉鹽 BROMOPHENOL BLUE SODIUM SALT 62625-28-9 50G ACS級Tmem18 英文名稱： 跨膜蛋白18抗體 ?0.2ml
phospho-TRIM25(Ser100) 英文名稱： 磷酸化雌激素反應指狀蛋白抗體 ?0.1ml
phospho-TUBB3 (Ser172) 英文名稱： 磷酸化神經細胞特異微管蛋白抗體 ?0.1ml
TRPM7 英文名稱： 瞬時受體電位離子通道蛋白7抗體（M亞家族） ?0.2ml
TRPM8 英文名稱： “冷”蛋白TRPM8抗體 ?0.2ml
TRPM3 英文名稱： 瞬時受體電位離子通道蛋白3抗體（M亞家族） ?0.2ml
TRIM25 英文名稱： 雌激素反應鋅指蛋白抗體 ?0.2ml
Twist2 英文名稱： TWIST蛋白2抗體抗體 ?0.2ml
phospho-TRIM25(The91) 英文名稱： 磷酸化雌激素反應指狀蛋白抗體 ?0.1ml
phospho-TERT(Ser1125) 英文名稱： 磷酸化端粒酶逆轉錄酶抗體 ?0.1ml
phospho-TSC1(Thr417) 英文名稱： 磷酸化結節硬化癥蛋白1抗體 ?0.1ml
Phospho-TSC2(Ser540) 英文名稱： 磷酸化結節硬化蛋白抗體 ?0.1ml
Phospho-TSC2(Ser1420) 英文名稱： 磷酸化結節硬化蛋白抗體 ?0.1ml
