【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人卵巢癌細胞；HO-8910培養
形態特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 HO-8910細胞株是1994年從一位51歲的中國卵巢癌患者腹水中建立的。 轉移到裸鼠中形成的腫瘤集聚與患者原病灶處的形態*。STR檢測發現SGC7901、SMMC7721、QGY7701、QGY7703、QSG7701、Ho-8910PM、Ho-8910、BEL7402、SMMC7721等多株細胞為同一遺傳背景，懷疑彼此間存在交叉污染。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清，10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
丙酮酸鈉 PYRUVIC ACID Soidium 試劑級
辣根過氧化物酶 HORSERADISH, PEROXIDASE, RZ 3.0 9003-99-0 10,000 Units 偶聯級
辣根過氧化物酶 PEROXIDASE,HORSERADISH, RZ 3.0 9003-99-0 25,000 Units 偶聯級
α-酮戊二酸二鈉,無水 A-KETOGLUTARIC ACID DISOD ANHY 305-72-6 1KG 試劑級
α-酮戊二酸二鈉,無水 A-KETOGLUTARIC ACID DISOD ANHY 305-72-6 250G 試劑級
α-酮戊二酸二鈉,無水 A-KETOGLUTARIC ACID DISOD ANHY 305-72-6 25G 試劑級
*,七水 SODIUM PHOSPHATE, DIBASIC, HEPTAHYDRATE 100 KG ACS級,美國藥典級
*,七水 SODIUM PHOSPHATE, DIBASIC, HEPTAHYDRATE 12 KG ACS級,美國藥典級
*,七水 SODIUM PHOSPHATE, DIBASIC, HEPTAHYDRATE 7782-85-6 1KG ACS級
*,七水 SODIUM PHOSPHATE,DIB,HEPTAHYDRATE 7782-85-6 2.5KG ACS級
*,七水 SODIUM PHOSPHATE,DIB,HEPTAHYDRATE 7782-85-6 500G ACS級
*,七水 SODIUM PHOSPHATE, DIBASIC, HEPTAHYDRATE 15000 50 KG ACS級,美國藥典級Gamma-taxilin 英文名稱： 脂多糖相關反應蛋白5/γ-taxilin抗體 ?0.2ml
Thymidylate synthase 英文名稱： 胸苷酸合成酶抗體 ?0.1ml
Thioredoxin 英文名稱： 硫氧還蛋白抗體 ?0.1ml
Tsg101 英文名稱： 腫瘤易感基因101蛋白抗體 ?0.1ml
TSPAN1 英文名稱： 四分子交聯體1抗體（四旋蛋白） ?0.2ml
TSPAN2 英文名稱： 四分子交聯體2抗體（四旋蛋白） ?0.2ml
TTC33 英文名稱： TTC33蛋白抗體 ?0.2ml
TSPAN3 英文名稱： 四分子交聯體3抗體（四旋蛋白） ?0.2ml
TLX2 英文名稱： T淋巴細胞白血病同源蛋白2抗體 ?0.2ml
