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黑人Burkitt淋巴瘤細胞;RAJI使用說明書

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所  在  地上海市

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更新時間:2017-01-21 12:04:56瀏覽次數:281次

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產品簡介

黑人Burkitt淋巴瘤細胞;RAJI使用說明書細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。

詳細介紹

產品名稱黑人Burkitt淋巴瘤細胞;RAJI使用說明書
貨期3-5天
發貨地上海

細胞名稱  黑人Burkitt淋巴瘤細胞;RAJI使用說明書
形態特性   淋巴母細胞
生長特性  懸浮生長
特征特性   淋巴母細胞樣的Raji細胞株源自一位11歲黑人男孩的左上頜骨的Burkitt淋巴瘤。 EBNA陽性。  
培養條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  胎牛血清,10%
傳代方法   1:2。3天內可長滿。
傳代情況  PN5
凍存條件   *培養基+8%DMSO
支原體檢測  陰性
STR   Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D13S317:13;D16S539:8,11;D18S51:17;D19S433:14,14.2;D21S11:28,31;D2S1338:22;D3S1358:15,16;D5S818:10,13;D7S820:10;D8S1179:14,15;FGA:19,27;TH01:6,7;TPOX:8,13;vWA:17,19
同工酶  
染色體  
使用權限  A類

復蘇操作要點: 
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
3.5% NaC1*脫羧酶發酵管    3.5% NaC1*脫羧酶發酵管    20支    BR
賴氨酸脫羧酶肉湯發酵管    賴氨酸脫羧酶肉湯發酵管    20支    BR
3% NaC1賴氨酸脫羧酶發酵管    3% NaC1賴氨酸脫羧酶發酵管    20支    BR
3.5% NaC1賴氨酸脫羧酶發酵管    3.5% NaC1賴氨酸脫羧酶發酵管    20支    BR
*肉湯發酵管    *肉湯發酵管    20支    BR
MR-VP發酵管    MR-VP發酵管    20支    BR
尿素酶發酵管    尿素酶發酵管    20支    BR
明膠發酵管    明膠發酵管    20支    BR
木糖-明膠培養基發酵管    木糖-明膠培養基發酵管    20支    BR
七葉苷發酵管    七葉苷發酵管    20支    BRTMEM106B    英文名稱:    跨膜蛋白106B抗體    ?0.2ml
Tau421    英文名稱:    微管相關蛋白Tau421抗體    ?0.2ml
CABP4    英文名稱:    瞬時受體電位通道蛋白4抗體    ?0.2ml
TPTE    英文名稱:    腫瘤/抗原44抗體    ?0.2ml
TACC1    英文名稱:    癌、胃癌抗原GA55抗體    ?0.2ml
TBRG4    英文名稱:    轉化生長因子β調節蛋白4抗體    ?0.2ml
TYK3    英文名稱:    *蛋白激酶3抗體    ?0.2ml
phospho-TYK3(Tyr402)    英文名稱:    磷酸化*蛋白激酶3抗體    ?0.1ml
TRPM1    英文名稱:    瞬時受體電位離子通道蛋白1抗體(M亞家族)    ?0.1ml

 

 

 


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