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上海撫生實業有限公司
人肝癌細胞;QGY-7703 [QGY7703]培養細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人肝癌細胞;QGY-7703 [QGY7703]培養
形態特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來自35歲女性的肝癌。 染色體數目變化大,異倍體多。 免疫熒光間接法AFP陽性反應。 異體移植能力強。 亞顯微結構方面,核與細胞質的比例高,大的多形核和多種細胞器亞顯微結構改變。 在Con A作用下凝集。倍增時間約為20.5小時。 用Northern blot方法,未能檢測到細胞中1.3kb LFIRE-1/HFREP-1 mRNA的表達。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10;D13S317:13.3;D16S539:9,10;D18S51:16;D19S433:13;D21S11:27,28;D2S1338:17;D3S1358:15,18;D5S818:11,12;D7S820:12;D8S1179:12;FGA:18,21;TH01:7;TPOX:12;vWA:16,18
同工酶
染色體
使用權限 A類
產品名稱 | 人肝癌細胞;QGY-7703 [QGY7703]培養 |
貨期 | 3-5天 |
發貨地 | 上海 |
人肝癌細胞;QGY-7703 [QGY7703]培養復蘇操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
人肝癌細胞;QGY-7703 [QGY7703]培養操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
5%乳糖發酵管 5%乳糖發酵管 20支 BR
1% NaC1阿拉伯糖發酵管 1% NaC1阿拉伯糖發酵管 20支 BR
3% NaC1阿拉伯糖發酵管 3% NaC1阿拉伯糖發酵管 20支 BR
3.5% NaC1阿拉伯糖發酵管 3.5% NaC1阿拉伯糖發酵管 20支 BR
1% NaC1蔗糖發酵管 1% NaC1蔗糖發酵管 20支 BR
3% NaC1蔗糖發酵管 3% NaC1蔗糖發酵管 20支 BR
3.5% NaC1蔗糖發酵管 3.5% NaC1蔗糖發酵管 20支 BR
*發酵管 *發酵管 20支 BR
1% NaC1*發酵管 1% NaC1*發酵管 20支 BR
3% NaC1*發酵管 3% NaC1*發酵管 20支 BR
3.5% NaC1*發酵管 3.5% NaC1*發酵管 20支 BR
1% NaC1纖維二糖發酵管 1% NaC1纖維二糖發酵管 20支 BR
厭氧肉肝湯 Anaerobic Beef Liver Broth 250克 供一般厭氧菌培養及其制備檢驗用Transportin 1 英文名稱: 轉運蛋白1抗體 ?0.2ml
THAP1 英文名稱: 核凋亡因子THAP1抗體 ?0.2ml
TIA1 英文名稱: 細胞毒顆粒相關蛋白TIA-1抗體 ?0.2ml
THYN1 英文名稱: 胸腺細胞核蛋白1抗體 ?0.1ml
TNFAIP3 interacting protein 3 英文名稱: 腫瘤壞死因子α誘導相互作用蛋白3抗體 ?0.2ml
TRPV3 英文名稱: 辣椒素受體3抗體 ?0.1ml
TEX261 英文名稱: TEX261蛋白抗體 ?0.2ml
TSHR 英文名稱: 促甲狀腺素受體抗體 ?0.1ml
人肝癌細胞;QGY-7703 [QGY7703]培養Phospho-TrkA(Tyr674 + Tyr675) + TrkB(Tyr706 + Tyr707) 英文名稱: 磷酸化*激酶A抗體 ?0.1ml
TLR3 英文名稱: Toll樣受體3抗體 ?0.1ml
TCRG 英文名稱: T細胞受體γ抗體 ?0.2ml
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