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人膠質瘤細胞;SHG-44 SHG44使用說明書

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所  在  地上海市

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更新時間:2017-01-21 12:31:17瀏覽次數:152次

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產品簡介

人膠質瘤細胞;SHG-44 [SHG44]使用說明書細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。

詳細介紹

產品名稱人膠質瘤細胞;SHG-44 [SHG44]使用說明書
貨期3-5天
發貨地上海

細胞名稱  人膠質瘤細胞;SHG-44 [SHG44]使用說明書
形態特性   成纖維細胞樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   SHG-44細胞株源自一例2-3級前沿淋巴結星細胞瘤。 染色體組型顯示89.2%的超三倍體。在Wistar大鼠和裸鼠中接種都能成功。 細胞含有神經系統*的S-100蛋白和星細胞*的GFA蛋白。 
培養條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  優質胎牛血清,10%
傳代方法   消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況  PN
凍存條件   *培養基+8%DMSO
支原體檢測  陰性
STR  
同工酶  
染色體  
使用權限  A類

人膠質瘤細胞;SHG-44 [SHG44]使用說明書復蘇操作要點: 
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
人膠質瘤細胞;SHG-44 [SHG44]使用說明書操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
結晶紫中性紅膽鹽瓊脂    VRBA    250克    用于大腸菌群的檢驗
SA瓊脂    Salmonella Arizona Agar    250克    亞利桑那沙門氏菌的選擇性分離
疊氮鈉葡萄糖肉湯    Azide Dextrose Broth    250克    鏈球菌、腸球菌、糞鏈球菌的增菌培養
KF鏈球菌瓊脂    KF Streptococcus Agar    100克    鏈球菌的選擇性分離和計數
EVA肉湯    EVA Broth    250克    用于鏈球菌的增菌培養
賴氨酸吲哚動力培養基    LIM Medium    250克    用于鏈球菌的分離培養;細菌的賴氨酸、吲哚和動力復合生化試驗
BETA-SSA瓊脂    BETA-SSA Agar    250克    鏈球菌的選擇性分離培養
胰酪胨大豆羊血瓊脂基礎    Trypticase Soy Sheep Blood Agar Base    250克    蠟樣芽孢桿菌的溶血測試驗
改良V-P培養基    V-P Medium Modified    250克    蠟樣芽孢桿菌的溶血試驗
R2A瓊脂    R-2A Agar    250克    飲用水中導生細菌分離培養
A1培養基    A1 Medium    250克    檢測水中的大腸菌群
酵母提取物瓊脂    Yeast Extract Agar    250克    水中細菌總數的檢測SLC22A11    英文名稱:    尿酸鹽重吸收轉運子1抗體    ?0.2ml
USE1    英文名稱:    囊泡轉運蛋白Use1抗體    ?0.2ml
Upstream Binding Protein 1    英文名稱:    上游結合蛋白1抗體    ?0.1ml
UNC93B    英文名稱:    內質網膜蛋白UNC93B抗體    ?0.2ml
UNC5B    英文名稱:    神經突起誘導因子受體UNC5B抗體    ?0.1ml
UNC5C    英文名稱:    神經突起生長誘導因子受體UNC5B抗體    ?0.2ml
人膠質瘤細胞;SHG-44 [SHG44]使用說明書UNC5D    英文名稱:    神經突起生長誘導因子受體UNC5D抗體    ?0.2ml
Unc5a    英文名稱:    神經突起生長誘導因子受體Unc5a抗體    ?0.2ml
UGCGL2    英文名稱:    二磷酸葡萄糖神經酰胺葡萄糖基轉移酶2抗體    ?0.2ml
Uricase    英文名稱:    尿酸酶    ?0.1ml
UGDH    英文名稱:    尿苷二磷酸葡萄糖脫氫酶抗體    ?0.2ml

 

 


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