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人胃腺癌細(xì)胞；SGC-7901 SGC7901培養(yǎng)

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人胃腺癌細(xì)胞；SGC-7901 [SGC7901]培養(yǎng)細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。

詳細(xì)介紹

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱 人胃腺癌細(xì)胞；SGC-7901 [SGC7901]培養(yǎng)
形態(tài)特性   上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性貼壁生長(zhǎng)
特征特性   這株細(xì)胞源自一位56歲女性胃腺癌患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  胎牛血清，10%
傳代方法   消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 PN
凍存條件   *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類

產(chǎn)品名稱	人胃腺癌細(xì)胞；SGC-7901 [SGC7901]培養(yǎng)
貨期	3－5天
發(fā)貨地	上海

人胃腺癌細(xì)胞；SGC-7901 [SGC7901]培養(yǎng)復(fù)蘇操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
人胃腺癌細(xì)胞；SGC-7901 [SGC7901]培養(yǎng)操作步驟：
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
V-P半固體瓊脂   Voges-Proskauer Semisolid Agar   250克   細(xì)菌V-P試驗(yàn)
胰蛋白胨水肉湯   Tryptone Broth   250克   靛基質(zhì)試驗(yàn)
明膠培養(yǎng)基   Gelatin Medium   250克   細(xì)菌明膠液化試驗(yàn)
靛基質(zhì)培養(yǎng)基   Indole Medium   250克   細(xì)菌靛基質(zhì)試驗(yàn)
丙二酸鹽培養(yǎng)基   Malonate Broth   10克   用于測(cè)定腸道細(xì)菌對(duì)丙二酸鹽的利用試驗(yàn)
脫氧核糖核酸酶瓊脂   Dnase Agar   100克   用于細(xì)菌DNA酶檢測(cè)
賴氨酸脫羧酶培養(yǎng)基   Lysine Decarboxylase Medium   5克   用于細(xì)菌賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)
脫羧酶對(duì)照試驗(yàn)培養(yǎng)基   Decarboxylase Control Medium   5克   脫羧酶試驗(yàn)陰性對(duì)照（無(wú)氨基酸）
*雙水解酶試驗(yàn)用培養(yǎng)基   AD   5克   細(xì)菌*水解試驗(yàn)，用于假單胞菌屬鑒別；弧菌的*試驗(yàn)
*葡萄糖斜面瓊脂   Arginine Dextrose Agar   100克   霍亂弧菌的復(fù)合生化試驗(yàn)UCP-1   英文名稱：   線粒體脫偶連蛋白1抗體   ?0.1ml
UCP-2   英文名稱：   線粒體脫偶連蛋白2抗體   ?0.1ml
UCP-3   英文名稱：   線粒體脫偶連蛋白3抗體   ?0.1ml
UBXD2   英文名稱：   UBX結(jié)構(gòu)域域蛋白D2抗體   ?0.2ml
UCHL3   英文名稱：   泛素硫酯酶L3抗體   ?0.2ml
UCHL1+3   英文名稱：   泛素硫酯酶L1+3抗體   ?0.2ml
人胃腺癌細(xì)胞；SGC-7901 [SGC7901]培養(yǎng)UBE3A   英文名稱：   人狀瘤病毒E6相關(guān)蛋白抗體   ?0.2ml
UBE2Q1   英文名稱：   泛素蛋白連接酶Q1抗體   ?0.2ml
UBE2U   英文名稱：   泛素蛋白連接酶U抗體   ?0.2ml
Ube2L6   英文名稱：   泛素載體蛋白L6抗體   ?0.2ml
Ube2H   英文名稱：   泛素激活酶2H抗體   ?0.2ml